[发明专利]一种产酶溶杆菌及其应用

权利要求书

1.一种产酶溶杆菌，其特征在于，所述产酶溶杆菌为产酶溶杆菌BN3-15菌株，所述产酶溶杆菌BN3-15菌株保藏编号为：CGMCC No.21259，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。

2.一种如权利要求1所述的产酶溶杆菌BN3-15在田间病害防治中的应用，所述病害为玉米大斑病、辣椒炭疽病、十字花科作物根肿病和三七根腐病。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述产酶溶杆菌BN3-15制成水剂、可湿性粉剂或种子包衣剂中的任意一种形式使用。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述产酶溶杆菌菌株BN3-15水剂的使用方法包括喷雾、灌根以及浸种。

5.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述产酶溶杆菌BN3-15水剂的制备方法，包括：

（1）菌种培养

①复壮培养：将NA培养基121℃灭菌30min后加入试管中，做成斜面，接种菌株后，恒温培养箱26℃培养24~48h；所述NA培养基的配方及处理方法为：葡萄糖l0g，蛋白胨5g，牛肉浸膏3g，酵母浸膏1g，琼脂粉17g，用蒸馏水补足到1000mL，调节pH=7.0；

②菌种摇床扩大培养：将斜面种子接种茄瓶斜面NA培养基上，于26℃条件下培养24~48h，获得茄瓶种子；

（2）发酵

①种子悬浮液的制备：用灭菌水洗下茄瓶斜面上的菌苔，得到种子悬浮液；

②接种：将种子悬浮液通过接种口，利用压差接入发酵罐培养基上；

③液体发酵：发酵罐培养基在接种后，培养36~48h；所述发酵罐培养基的罐温为25~32℃，罐压为0.5kg/cm²，罐内搅拌速度为200r/min，在接种升压过程中，罐压不超过1.5kg/cm²。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述发酵罐培养基的配方及处理方法为：发酵培养基包含5%蛋白胨、10%玉米粉、20%黄豆粉、2%酵母提取物、20%蔗糖、3%磷酸氢二钾、10%甘油，灭菌前调节pH=7.0，于121℃灭菌30min。

7.如权利要求3所述的产酶溶杆菌BN3-15在田间病害防治中的应用，其特征在于，所述产酶溶杆菌菌株BN3-15包衣剂的制备方法，包括：

（1）将产酶溶杆菌接种于KB液体培养液，于28℃、160r/min进行摇瓶发酵培养48h制备成发酵液，初始产酶溶杆菌含量≥1×10⁹cfu/mL；

（2）将聚乙烯醇与壳聚糖混合物、木质素磺酸钠、黄原胶、丙三醇、曙红混合，搅拌均匀，然后放入研磨机中进行研磨，研磨时间为4~8h，研磨至物料的平均粒径小于5μm，制备成助剂；

（3）将步骤（1）所得产酶溶杆菌发酵液与步骤（2）所得助剂按体积1：99的比例混匀制得生物型种衣剂。

8.一种如权利要求1所述的产酶溶杆菌作为生长剂在促进白菜、玉米或三七生长中的应用。