[发明专利]一种金龙胆草中的皂苷制备、检测方法及应用

说明书

本发明公开了一种金龙胆草中的皂苷制备、检测方法及应用，包括以下步骤：S1：将金龙胆草全草粉碎后，使用60%~85%的乙醇进行水浴加热回流提取，得到金龙胆草料液；S2：趁热过滤金龙胆草料液，并合并滤液，55℃~80℃减压回收溶剂，至乙醇完全挥发，得到浓溶液；S3：使用蒸馏水、20%乙醇进行稀释，得到浓度为15 g/100ml~30g/100ml的生药；S4：使用离心机进行离心沉淀，取上清液；S5：将上清液过AB‑8大孔树脂柱，分别使用蒸馏水、70%乙醇进行梯度洗脱；S6：收集70%乙醇洗脱液，55℃~80℃减压回收溶剂，干燥、粉碎后得到金龙胆草皂苷。不使用其他种类有机溶剂辅助，降低溶剂残留与生产能耗，得到的金龙胆草皂苷纯度较高。

技术领域

本发明涉及金龙胆草加工技术领域，尤其涉及一种金龙胆草中的皂苷制备、检测方法及应用。

背景技术

金龙胆草是我国四川省的一种民间药材，《中国药典2020版》对其做出的定义为：菊科植物苦蒿的干燥地上部分；性状为：茎呈圆柱形，少分枝，长30~100cm，直径0.2~0.6cm;表面黄绿色或浅棕黄色，有纵棱和多数白色长绒毛；质硬而脆，易折断；单叶互生，叶片多卷缩、破碎，完整者展平后呈羽状深裂至全裂，裂片披针形，黄绿色，两面密被白色绒毛；下部叶具柄，上部叶几无柄；头状花序直径约1cm，花黄白色；瘦果浅黄色，扁平，冠毛长5~6mm；气微，味极苦。

现有技术中，金龙胆草的皂苷制备方法需要使用到除乙醇外其他种类的有机溶剂，造成的溶剂残留与能耗会影响生产的企业成本与质量;且使用了不同浓度的高浓度乙醇进行提取，产品的工艺流程设计较为繁琐，不利于工业化大生产与质量控制。另外金龙胆草的皂苷片生产工艺中使用浸渍法进行提取，酸碱沉淀法沉淀其他杂质得到金龙胆草总皂苷，可这种方法提取时提取率不高，纯化需要使用大量酸碱所产生的废液对于环境负担大，废水处理成本高，且得到的产物中总皂苷含量也不高。

发明内容

为解决现有技术不足，本发明提供一种金龙胆草中的皂苷制备、检测方法及应用，不使用其他种类有机溶剂辅助，降低溶剂残留与生产能耗；统一提取使用的乙醇浓度，简化工艺步骤；安全系数更高，危害与毒性显著性降低；得到的金龙胆草皂苷纯度较高。

为了实现本发明的目的，拟采用以下方案：

一种金龙胆草中的皂苷制备方法，包括以下步骤：

S1：将金龙胆草全草粉碎后，使用60%~85%的乙醇进行水浴加热回流提取，得到金龙胆草料液，其中，水浴加热温度70℃~90℃，提取时的料液比为1：6~1：10，提取三次，每次2h；

S2：趁热过滤金龙胆草料液，并合并滤液，55℃~80℃减压回收溶剂，至乙醇完全挥发，得到浓溶液；

S3：使用蒸馏水、20%乙醇进行稀释，得到浓度为15 g /100ml ~30g/100ml的生药；

S4：使用离心机进行离心沉淀，取上清液，其中，离心速度500 rpm ~800rpm，离心时间8min~15min；

S5：将上清液过AB-8大孔树脂柱，分别使用蒸馏水、70%乙醇进行梯度洗脱；

S6：收集70%乙醇洗脱液，55℃~80℃减压回收溶剂，干燥、粉碎后得到金龙胆草皂苷。

进一步的，步骤S1中：使用80%的乙醇水浴加热回流提取，提取时的料液比为1：8，水浴加热温度80℃。

进一步的，步骤S2和S6中：60℃减压回收溶剂。

进一步的，步骤S4中：离心速度600 rpm，离心时间12min。

一种金龙胆草中的皂苷检测方法，利用所述检测方法检测上述所述的金龙胆草中的皂苷制备方法制得的金龙胆草皂苷，检测方法包括利用齐墩果酸作为对照品，香草醛-乙醇-硫酸法显色检测所述金龙胆草皂苷中的皂苷含量、出膏率。

进一步的，皂苷含量在60%~80%，出膏率1.5%~3.0%。