[发明专利]一种从橄榄叶中同时提取橄榄苦甙、山楂酸和齐墩果酸的方法

说明书

本发明公开了一种从橄榄叶中同时提取橄榄苦甙、山楂酸和齐墩果酸的方法，包括以下步骤：将橄榄叶粉碎后用乙醇提取，将提取液固液分离，得到上清液和沉淀物；将上清液上大孔吸附树脂柱，用水和乙醇依次进行洗脱，收集乙醇洗脱液，即得橄榄苦甙提取物；将沉淀物加入乙醇提取后固液分离，收集滤渣；取滤渣加入碱水进行提取，提取液固液分离，收集滤液；将所得的滤液使用阴离子交换树脂进行纯化，依次使用水、碱性乙醇溶液洗脱，收集碱性乙醇洗脱部分，浓缩，醇沉后固液分离，所得上清液即为山楂酸，所得沉淀物即为齐墩果酸。本发明方法可以同时获得山楂酸、齐墩果酸及橄榄苦甙，简单，高效，对环境友好，易实现工业化生产。

技术领域

本发明属于生物提取技术领域，具体涉及一种从橄榄叶中同时提取橄榄苦甙、山楂酸和齐墩果酸的方法。

背景技术

油橄榄叶为木犀科植物油橄榄(OleaeuropaeaL，Olea-africana，OleacapensisL.)的干燥叶，花期4-5月，果10-12月成熟。其具有较强的抵抗微生物侵袭能力，可生长几百年，取物早已被地中海地区的人们当作民间医药来治疗发烧和其他疾病如疟疾等。橄榄叶富含橄榄苦苷、羟基酪醇、齐墩果酸、山楂酸、黄酮等活性成分。山楂酸根据研究表明：对人体具有安全性高，现代药理学表明，山楂酸具有抗菌消炎、降血糖血脂、抗HIV抗肿瘤、抗骨质疏松等多种药理活性。橄榄苦甙具有清除超氧阴离子自由基(O₂－·)、过氧化氢(H₂O₂)、NO·和过氧亚硝基阴离子(ONOO－)的能力，还有抗癌、抗血栓、预防动脉硬化和神经保护等作用，因此被广泛应用在制药、保健食品和护肤品等方面。齐墩果酸作为抗肝炎已经上市多年，且研究发现齐墩果酸具有促免疫作用，目前相关技术中很难有一种能够同时提取三种橄榄苦甙、山楂酸、齐墩果酸的方法，能够使得提取的橄榄苦甙、山楂酸、齐墩果酸的得率均在90％以上。

发明内容

本发明旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出一种从橄榄叶中同时提取橄榄苦甙、山楂酸、齐墩果酸的方法，该方法简单，高效，得到的橄榄苦甙、山楂酸和齐墩果酸的纯度高，收率大。

根据本发明的一个方面，提出了一种从橄榄叶中同时提取橄榄苦甙、山楂酸、齐墩果酸的方法，包括以下步骤：

S1、将橄榄叶粉碎后用乙醇提取，将提取液过滤，取滤液脱除乙醇后进行固液分离，得到上清液和沉淀物；

S2、将步骤S1得到的上清液上大孔吸附树脂柱，依次用水和乙醇进行洗脱，收集乙醇洗脱液，即得橄榄苦甙提取物；

S3、将步骤S1得到的沉淀物加入体积浓度为10％～30％的乙醇提取后，固液分离，收集滤渣；

S4、取步骤S3得到的滤渣加入碱水进行提取，提取液固液分离，收集滤液；

S5、将步骤S4所得的滤液使用阴离子交换树脂进行纯化，依次使用水、碱性乙醇洗脱，收集碱性乙醇洗脱液；

S6、将步骤S5所得的碱性乙醇洗脱液浓缩，加酸调pH后，过滤，滤渣加入乙醇，醇沉后固液分离，所得上清液即为山楂酸；所得沉淀物即为齐墩果酸。

在本发明的一些实施方式中，所述步骤S1中，橄榄叶与乙醇的料液比为1g：6～15mL。

在本发明的一些实施方式中，所述步骤S1中，乙醇的体积浓度为40％～90％，提取为加热回流提取，提取温度为60℃～85℃，提取次数为2～3次，每次提取时间为1～3h。

在本发明的一些实施方式中，所述步骤S1中，固液分离采用离心。

在本发明的一些实施方式中，所述步骤S1中，脱除乙醇的方式采用减压蒸馏。

在本发明的一些实施方式中，所述步骤S2中，乙醇的体积浓度为50～70％。