[发明专利]一种卵黄抗体的制备方法及卵黄抗体

说明书

本发明公开一种卵黄抗体的制备方法及卵黄抗体，属于抗体制备技术领域，该卵黄抗体的制备方法为：（1）配置含有磷钨酸和氯化镁的反应液：向纯化水中加入磷钨酸和氯化镁，使磷钨酸的浓度为0.4%‑0.8%，氯化镁的浓度为0.3%‑0.9%，并调节反应液pH至4.0‑7.0；（2）收集高免蛋蛋黄，与纯水充分混匀后得蛋黄稀释液；（3）将反应液与蛋黄稀释液混合，搅拌均匀后静置；（4）离心并收集上清液，将上清液过滤除菌后即得到卵黄抗体液。本发明的卵黄抗体是通过本发明的卵黄抗体的制备方法制备获得。本发明制备方法操作简便，生产效率高，生产成本低，得到的卵黄抗体效价高、产量大，有效解决了现有卵黄抗体生产步骤繁杂，抗体损失大、成本高等问题。

技术领域

本发明属于抗体制备技术领域，具体地说涉及一种卵黄抗体的制备方法及卵黄抗体。

背景技术

卵黄抗体（IgY）是指产蛋鸡受特定抗原免疫后产生并转移和贮存在卵黄中的特异性抗体，具有良好的治疗效果、较高的特异性、较好的稳定性以及无耐药性等特点，近年来广泛应用于动物疾病的防治。

如何将IgY从卵黄中有效提取出来，是将其广泛应用的前提，目前卵黄抗体的大规模提取主要有酸化水提法、氯仿抽提法、聚乙二醇法、辛酸法、硫酸铵沉淀法等方法，但以上几种方法各有缺点：1、酸化水提法，该方法生产的抗体需进一步浓缩才能使用，且杂质多、稳定性差，给动物注射后易产生应激和过敏反应，安全性低；2、氯仿抽提法，该方法氯仿用量大，提取成本高，产品纯度低，且氯仿具有毒性；3、聚乙二醇法，该方法所需聚乙二醇较多，导致生产成本高，且提取纯度低，残留的聚乙二醇会导致IgY稳定性降低；4、辛酸法，该方法抗体损失大，纯度低。并且更进一步的，以上方法均无法回收利用卵黄提取抗体后的副产品。

针对上述问题，特提出本发明。

发明内容

针对现有技术的种种不足，为了解决上述问题，现提出一种卵黄抗体的制备方法及卵黄抗体。为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种卵黄抗体的制备方法，包括如下步骤：

（1）配置含有磷钨酸和氯化镁的反应液：向纯化水中加入磷钨酸和氯化镁，使磷钨酸的浓度为0.4%-0.8%，氯化镁的浓度为0.3%-0.9%，并调节反应液pH至4.0-7.0；

（2）收集高免蛋蛋黄，与纯水充分混匀后得蛋黄稀释液；

（3）将反应液与蛋黄稀释液混合，搅拌均匀后静置；

（4）离心并收集上清液，将上清液过滤除菌后即得到卵黄抗体液。

优选的,步骤（1）反应液中磷钨酸的浓度为0.44%，氯化镁的浓度0.8%。

优选的,步骤（2）中蛋黄稀释液的制备方法为，将高免蛋表面消毒，分离出蛋黄，蛋黄与纯水按1：3-8的比例充分混匀后即得蛋黄稀释液。

优选的,步骤（3）中反应液与蛋黄稀释液以1:5-1：10的体积比混匀。

优选的,步骤（3）中反应液与蛋黄稀释液以1:7.5的体积比混匀，其中蛋黄稀释液由蛋黄与纯水按1：4的比例充分混匀后获得。

优选的,步骤（4）中离心所使用的仪器为碟式离心机，离心条件为7500rpm，进料速度为400-800L/h。

优选的,步骤（4）中过滤除菌的方式采用0.22微米的卧式板框过滤器过滤和0.22微米的除菌滤芯过滤。

一种卵黄抗体，由上述的卵黄抗体的制备方法制备获得。

有益效果：

1、本发明提供的卵黄抗体的制备方法操作简便，生产效率高，生产成本低，得到的卵黄抗体效价高、产量大，可代替现有的抗体提取工艺，具有较好的推广价值。