[发明专利]一种同时测定酒醅中氨基甲酸乙酯和尿素含量的方法

说明书

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种同时测定酒醅中氨基甲酸乙酯和尿素含量的方法。本发明提供了一种氨基甲酸乙酯和尿素的检测方法，所述方法包括使用高效液相色谱法同时测定酒醅样品中所述的氨基甲酸乙酯和尿素。本发明以乙醇为溶剂，通过均质、离心、净化、衍生后进液相色谱分析。本发明的这种方法，具有快速、稳定、准确的特点，提高了酒醅中氨基甲酸乙酯和尿素检测分析效率，为白酒发酵过程中氨基甲酸乙酯的研究提供了技术支撑。

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种同时测定酒醅中氨基甲酸乙酯和尿素含量的方法。

背景技术

氨基甲酸乙酯(Ethyl carbamate，EC)，又称脲烷(Urethane)，是发酵食品和酒精饮料在发酵、贮存过程中产生的一种副产物，广泛应用于商业和医学领域。EC对多种动物(鼠、仓鼠和猴子等)具有遗传毒性和致癌性，对人类具有潜在的致癌风险。2007年，世界卫生组织国际癌症研究机构(IARC)将EC由2B类致癌物重新归类为2A类(很可能对人类致癌)致癌物。

中国白酒采用独特的固态发酵模式，以大曲、小曲作为微生物源进行糖化和发酵，其多种微生物自然接种以及长时间的固态发酵生产方式增加了白酒酿造过程中EC产生机理研究的复杂性。目前，报道的关于白酒中EC的机理研究存在局限性，范文来等^[1]研究了清香型、浓香型、兼香型白酒的酒醅发酵过程中EC与尿素的变化关系，结果表明不同香型酒酿造过程酒醅中尿素和EC的变化趋势类似，且二者具有一定相互关系。曾婷婷等^[2]研究了特香型酒醅发酵过程中EC和尿素的变化规律，结果表明酒醅发酵过程中EC的变化与尿素浓度变化基本同步。梁晨^[3]跟踪分析了酱香型、芝麻香型白酒发酵过程中EC及其前体物质的变化，结果表明尿素是白酒发酵过程中EC形成的主要前体物质之一。

范文来等人采用了顶空固相微萃取技术结合气相色谱-质谱检测白酒酒醅中氨基甲酸乙酯的含量(耗时约110min)，采用比色法测定了酒醅中尿素浓度(耗时约45min)，并研究了不同香型酒醅中尿素和EC的变化趋势。曾婷婷等人采用了GC-MS检测特香型酒醅中氨基甲酸乙酯含量(耗时约65min)，液相色谱荧光检测器测定酒醅中尿素浓度(仅前处理耗时约40min)。以上方法检测酒醅中EC和尿素含量，均采用了不同的检测方法，不同的检测仪器，单个方法前处理也较复杂，耗时长，且对人员的要求较高。

发明内容

一些实施方案中，本发明提供了一种氨基甲酸乙酯和尿素的检测方法，所述方法包括使用高效液相色谱法同时测定酒醅样品中所述的氨基甲酸乙酯和尿素。

一些实施方案中，所述方法包括酒醅样品的前处理步骤，所述前处理步骤中使用乙醇溶液对所述的酒醅样品进行提取。

一些实施方案中，所述乙醇的浓度为0～100％(v/v)。

一些实施方案中，所述乙醇的浓度为0～75％(v/v)。

一些实施方案中，所述乙醇的浓度为0～60％(v/v)。

一些实施方案中，所述乙醇的浓度为15～60％(v/v)。

一些实施方案中，所述乙醇的浓度为20～60％(v/v)。

一些实施方案中，所述提取方法包括均质、浸泡过夜或超声。

一些实施方案中，所述提取方法为均质。

一些实施方案中，所述均质时间为1～30min。

一些实施方案中，所述均质时间为1～5min。

一些实施方案中，所述均质时间为2～4min。

一些实施方案中，所述的方法包括以下步骤：(1)取出酒醅样品加入乙醇进行均质；(2)均质完成后离心，取上清液；(3)活性炭净化；(4)衍生；(5)衍生后进样，使用高效液相色谱法进行分析。