[发明专利]一株防治重楼灰霉病的土地类芽孢杆菌及其应用

说明书

本发明属于植物病虫害防治技术领域，尤其涉及一株防治重楼灰霉病的土地类芽孢杆菌及其应用。本发明提供的土地类芽孢杆菌株来源于重楼叶片内部，和重楼自身循环系统具有良好的兼容性；菌剂制作简单且成本低，无毒、无害及无环境污染，有利于安全有效的控制重楼灰霉病，提高其产量和品质，同时有利于重楼的绿色栽培，保护农田生态系统，促进重楼产业的可持续发展。该菌剂有利于改良重楼种植土壤，增加土壤中的微生物多样性，促进重楼产量和有效成分含量。

技术领域

本发明属于植物病虫害防治技术领域，尤其涉及一株防治重楼灰霉病的土地类芽孢杆菌及其应用。

背景技术

重楼(Paris polyphylla)是百合科药用植物，广泛分布在我国四川、云南、贵州、湖南、湖北等地，其具有抑制病菌、清热解毒和消肿止痛等功效，临床可用于镇定镇痛、治疗毒蛇咬伤、治疗惊风抽搐、抗癌及保护心血管系统等。此外，重楼是云南白药、宫血宁、季德胜蛇药等中成药的主要原材料，其主要药效成分包括蚤休甙、薯蓣皂甙、甾体及生物碱等。由于重楼生长缓慢，加之人们长期滥采乱挖，野生重楼资源濒临枯竭，已不能满足市场需求，导致重楼市场价格逐年上升，近年亩效益近20万元。随着各级政府对生物医药，大健康产业的重视，中药材重楼因为诸多功效，成为其道地产区的主打产业。近年来，重楼人工种植面积逐年扩大，随之而来的病害问题如意突出，湖北、湖南、四川等地重楼灰霉病(Botrytis cinerea)呈现爆发趋势，其中湖北省各个基地平均发病率达55％左右，严重可达100％，每年3-5月，重楼田间湿度较大气温适宜，是重楼灰霉病发生最严重的时段。

对于灰霉病防治目前主要为化学防治，多菌灵、环酰菌胺、对甲抑菌灵、咯菌腈等是防治灰霉病常用药剂。由于中药材登记药剂较少，无药可用现象严重，造成了农药违规使用事件频发。实际生产中农药药剂的滥用和单一药剂的长期使用导致农残超标、环境污染、致病菌抗药性的问题突出，严重威胁重楼的品质。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一株防治重楼灰霉病的土地类芽孢杆菌及其应用，目的在于解决现有技术中的一部分问题或至少缓解现有技术中的一部分问题。

本发明是这样实现的，一株防治重楼灰霉病的土地类芽孢杆菌，名称为土地类芽孢杆菌PY8(Paenibacillus terrae PY8)，于2020年9月4日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为：CCTCC NO：M2020462。地址：中国武汉武汉大学。

本发明还提供了如上述的一株防治重楼灰霉病的土地类芽孢杆菌在制备具有链霉素抗性的灰霉病防治菌剂中的应用。

本发明还提供了一种具有链霉素抗性的灰霉病防治菌剂，包含如上述的土地类芽孢杆菌。

本发明还提供了如上述的一种具有链霉素抗性的灰霉病防治菌剂的制备方法，包括将土地类芽孢杆菌接种于NB液体培养基中，28℃条件下有氧发酵，得到抑菌发酵液。

进一步地，还包括将抑菌发酵液离心，收集上清液，滤膜过滤后，将滤液与NA混合。

进一步地，所述制备方法包括将土地类芽孢杆菌涂布于NA培养基活化；将活化好的土地类芽孢杆菌接种于NB液体培养基中进行有氧发酵，制备发酵种子液；之后将发酵种子液接种于NB液体培养基中进行有氧发酵，得到抑菌发酵液。

进一步地，抑菌发酵液中活菌体浓度达到1×10⁸CFU/ml以上。

进一步地，抑菌发酵液中活菌体浓度达到1×10¹⁰CFU/ml以上。

本发明还提供了如上述的土地类芽孢杆菌在防治重楼灰霉病中的应用。

本发明还提供了如上述的土地类芽孢杆菌在调控重楼产量和/或重楼叶片细菌群落结构中的应用。

进一步地，重楼产量包括单株根鲜重、重楼皂苷Ⅰ含量及重楼皂苷Ⅱ含量中的至少一种。