[发明专利]基于特征性肽段检测人血浆中特瑞普利单抗药物浓度的液相色谱串联质谱方法

说明书

本文涉及基于特征性肽段检测人血浆中特瑞普利单抗药物浓度的液相色谱串联质谱方法。本文提供通过超高效液相色谱串联质谱法(UPLC‑MS/MS)测定特瑞普利单抗浓度的方法，其中所述方法采用ASGYTFTDYEMHWVR作为特征性肽段进行测定。本发明的方法简单、快捷，开发周期短，具有良好的重复性。

技术领域

本发明涉及检测药物浓度的方法。具体而言，本发明涉及通过超高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定特瑞普利单抗(Toripalimab) 的药物浓度的方法。

背景技术

引言

程序性细胞死亡蛋白-1(programmed cell death protein-1，PD-1)及其配体(programmed cell death protein ligand-1，PD-L1)是一对免疫共刺激分子，PD-1主要表达于活化的T细胞表面，而肿瘤细胞通过表达其配体 PD-L1与PD-1结合进而抑制T细胞的激活，抑制机体的抗肿瘤免疫应答反应，实现免疫逃逸[1]。针对PD-1/PD-L1的单克隆抗体药物能阻断PD-L1 与PD-1的结合，进而增强免疫细胞的抗肿瘤活性，促进肿瘤细胞的免疫清除，该类药物在多种恶性肿瘤中已展示出较好的临床疗效反应和生存获益，目前已被FDA批准用于治疗多种类型的肿瘤。特瑞普利单抗 (Toripalimab或JS001)是上海君实生物医药科技股份有限公司研制开发的人源化抗PD-1单克隆抗体药物，已于2018年12月17日获得国家药品监督管理局有条件批准上市，用于治疗既往标准治疗失败的局部进展或转移性黑色素瘤[2]。JS001单药以及联合化疗或靶向药物治疗恶性肿瘤的多项临床试验正在进行中，但定量检测JS001的完整方法学文章尚未被报道，仅有几篇文章提及应用电化学发光免疫分析法(Electrical chemiluminescent immunoassay，ECLIA)对其检测[3-5]。但ECLIA法具有一定的局限性，如获得特异的抗原或抗体周期较长、样本稀释倍数较高、线性范围较窄(一般不到两个数量级)、精密度差、易受基质干扰、存在交叉反应等。

因此，本领域需要提供能够定量检测患者血浆中特瑞普利单抗的药物浓度的改善的方法。

[参考文献]

[1]Fife BT，Pauken KE.The role of the PD-1pathway in autoimmunity andperipheral tolerance[J].Ann N Y Acad Sci.2011Jan； 1217：45-59.

[2]Keam SJ.Toripalimab：First Global Approval.Drugs.2019 Apr；79(5)：573-578.

[3]Yang JL，Dong LH，Yang S，et al.Safety and clinical efficacy oftoripalimab，a PD-1mAb，in patients with advanced or recurrent malignancies ina phase I study.Eur J Cancer.2020May；130：182—192.

[4]Wei XL，Ren C，Wang FH，et al.A phase I study of toripalimab，an anti-PD-1antibody，in patients with refractory malignant solid tumors.Cancer Commun(Lond).2020Aug；40(8)：345-354

[5]Tang BX，Yan XQ，Sheng XN，et al.Safety and clinical activity with ananti-PD-lantibody JS001in advanced melanoma or urologic cancer patients. JHematol Oncol.2019Jan 14；12(1)：7.

发明内容