[发明专利]一种改进的中性粒细胞NETs免疫荧光检测方法在审
| 申请号： | 202110605556.3 | 申请日： | 2021-05-31 |
| 公开（公告）号： | CN113310963A | 公开（公告）日： | 2021-08-27 |
| 发明（设计）人： | 赵毅;黎艳红;陈桃;胡惠方;孙蕊 | 申请（专利权）人： | 四川大学华西医院 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64;G01N33/53 |
| 代理公司： | 长沙新裕知识产权代理有限公司 43210 | 代理人： | 赵超 |
| 地址： | 610000 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 改进 中性 粒细胞 nets 免疫 荧光 检测 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种改进的中性粒细胞NETs免疫荧光检测方法，其特征在于：在多聚甲醛固定前先常温干燥6～12小时。
2.根据权利要求1所述的免疫荧光检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤S1、提取中性粒细胞，并调整中性粒细胞浓度；
步骤S2、将中性粒细胞加入细胞培养板内，给予或不给予中性粒细胞NETs刺激剂，37℃细胞培养箱孵育；
步骤S3、收集细胞进行甩片机离心；
步骤S4、甩完片后，取出甩完片的细胞黏附片子；
步骤S5、常温干燥6～12h后，多聚甲醛常温固定，Triton透化，BSA常温封闭，T-PBS洗涤；孵育一抗，T-PBS洗涤，常温孵育二抗，DAPI染核封片荧光镜下观察。
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