[发明专利]一种甘氨酸作为公猪精液常温保存液中有效成分的应用

说明书

本发明公开了一种甘氨酸作为公猪精液常温保存液中有效成分的应用，以甘氨酸、葡萄糖、EDTA二钠、柠檬酸钠、柠檬酸、Tris、碳酸氢钠、青霉素、链霉素和多黏菌素为主要成分，可以对精液于常温下以液态形式进行有效保存，提高了鲜精保存品质，延长了精液的保存时间，有利于提高优良种畜利用率并获得高受胎率；同时生产成本低，便于大规模推广应用。

技术领域

本发明涉及猪繁殖技术领域，特别涉及一种猪精液常温保存稀释液配方。

背景技术

猪人工授精技术主要包括精液采集、精液保存与运输、人工输精等环节，为提高公畜站工作效率、优良种猪利用率及使用年限以及加快种群扩繁速度、减少流行病传染、提高养殖户经济效益、加快猪产业发展提供了技术依据。猪精液保存作为猪人工授精技术中承上启下的关键环节，直接影响种公猪的利用率和母猪的配种、妊娠，目前国内外关于猪精液保存已经有了较为深入的研究，且相关研究成果表明营养物质组成、pH、氧化损伤和病菌污染等因素均影响猪精液的保存效果。精液的稀释和保存是猪人工授精关键技术环节，现阶段猪精液的保存方式根据保存温度可以分为冷冻保存、低温保存和常温保存。

冷冻保存是利用超低温控制精子代谢的一种保存技术，一般是将精子保存在液氮(-196℃)或干冰(-79℃)中。由于猪精子质膜中胆固醇与磷脂的比值低，对低温敏感，使其容易在保存过程中受到不可逆转的伤害，因而目前猪精液冷冻保存技术主要用于保存优良的公猪种质资源以及保护濒临灭绝地方品种。

低温保存是指将猪精液保存在0～5℃的低温下使猪精子的代谢水平下降，从而延长精子存活时间。但由于低温会导致猪精子冷休克死亡，目前在养猪生产中没有应用。

常温保存是指将猪精液保存在15～17℃，该温度下猪精子代谢受到抑制但并未损害精子。精液常温保存以其操作简单以及可以提高种猪利用率和获得高受胎率等特点，更加迎合以良种公畜的人工授精站为主的猪生产发展现状，全球范围内大约99％的猪人工授精都是采用的常温保存精液。

猪精液常温保存中，通过稀释液的组成成分、渗透压、pH值及精液的稀释倍数、保存温度共同决定对精液的保存效果，稀释液主要成分包括缓冲剂、营养剂和添加剂。商品化精液稀释液通常价格较高，增加了养殖成本。并且，常见的精液常温保存稀释液仅能使精子的活力保持在0.5～0.6一段有限的时间(大多数猪场采用的稀释液对精液的有效保存时间仅为2～3天)，不能满足对于扩大良种公畜站的辐射范围及种畜利用率的发展需要，影响人工授精技术的推广应用。

甘氨酸是一种中性氨基酸，价格低廉。甘氨酸在精液品质好的公猪精液中含量高，而在精液品质差的精液中含量低，表明甘氨酸对猪精子重要。中国专利CN107094755A报道了含有包括甘氨酸在内的多种氨基酸成分的稀释液配方，其中各氨基酸用于提供能量，但复合添加多种氨基酸可能会对精子产生毒害作用，随着精子代谢活动的持续进行这种作用愈发明显，从而无法延长精液有效保存时间。同时，该专利并未说明稀释液配方对精子提供能量的机制。

商品化稀释液Modena不含甘氨酸，仅能在一定保存时间范围内满足精子保存期间正常的能量需求，随着保存时间延长，其无法消除精子保存期间受到的不利因素，例如能量代谢降低、ROS产生增多等的影响。

发明内容

本发明的目的在于提供一种甘氨酸作为公猪精液常温保存液中有效成分的应用，通过使用含有甘氨酸的稀释液对猪精液起到良好的常温保存效果，且成本低廉。

为达到上述目的，本发明采用了以下技术方案：

一种猪精液常温保存稀释液，该常温保存稀释液的成分包括26～28g/L的葡萄糖、2.10～2.45g/L的EDTA二钠、6.8～7.0g/L的柠檬酸钠、2.8～3.0g/L的柠檬酸、5.55～5.75g/L的Tris、0.9～1.1g/L的碳酸氢钠、4～20万IU/L的青霉素、4～20万IU/L的链霉素、4～20万IU/L的多黏菌素和1～80mmol/L的甘氨酸。