[发明专利]一种增菌液及其在检测唐菖蒲伯克霍尔德氏菌中的用途

说明书

一种增菌液及其在检测唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(椰毒假单胞菌酵米面亚种)中的用途，所述增菌液含有如下组分：马铃薯葡萄糖水溶液、龙胆紫、氯霉素、多黏菌素B、脱氢乙酸钠。该增菌液对目标菌株具有良好的增菌效果，同时能够有效抑制日常检测过程中出现频率较高的非目标菌的生长，降低非目标菌的干扰，提高目标菌的检出率以及工作效率。本发明制备工艺简单、成本低廉、可操作性强，适用于各类食品中唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(椰毒假单胞菌酵米面亚种)的增菌。

技术领域

本发明涉及食品微生物安全监测领域，具体涉及一种增菌液及其在检测唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(椰毒假单胞菌酵米面亚种)中的用途。

背景技术

椰毒假单胞菌酵米面亚种是一类革兰氏阴性短杆菌，无芽孢，最适生长温度37℃，最适pH 5～6，于1999年被划分为唐菖蒲伯克霍尔德氏菌的一个病原型，存在于谷物类发酵制品、变质银耳和木耳等食品中。菌株产米酵菌酸毒素，该毒素致死率高达40％～100％，至今没有文献报道相关有效解毒药。米酵菌酸在人体内主要通过消化道粘膜吸收，经过血液循环进入到身体，主要的靶器官是肝、脑、肾等器官，发病急，潜伏期多数为2～24h。

唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(椰毒假单胞菌酵米面亚种)常用的检测方法是国家标准《GB 4789.29-2020食品安全国家标准食品微生物学检验唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(椰毒假单胞菌酵米面亚种)检验》，该方法采用GVC增菌液进行增菌，改良马铃薯葡萄糖琼脂培养基(mPDA)和PCFA培养基进行选择性分离。日常检测过程中发现，样品经过GVC增菌液增菌后增菌液表层会出现一层白色菌膜，该菌膜由细菌和霉菌组成；同时增菌后的菌悬液划线在分离平板mPDA培养基中出现非目标菌多、目标菌菌落特征不明显等现象，主要表现为：非目标细菌蔓延生长，菌落呈粘稠状，在mPDA培养基上覆盖平板，掩盖唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(椰毒假单胞菌酵米面亚种)的生长；霉菌蔓延生长，覆盖目标菌株，不利于挑取目标菌；目标菌菌落较小、形态不典型如干燥以及目标菌量少等，加大了目标菌分离鉴定的难度。对近上千份样品的检测过程中发现经过GVC增菌液增菌和mPDA培养基分离出的主要非目标菌种类如下：假单胞菌属，如荧光假单胞菌、恶臭假单胞菌、食油假单胞菌；肠杆菌属，如霍氏肠杆菌；分散泛菌，解甘露醇罗尔斯顿菌和真菌类如霉菌等。这些非目标菌的存在，一方面会抢夺营养物质，一定程度影响目标菌的生长繁殖；另一方面会加大可疑菌落挑取难度，甚至出现有些目标菌被杂菌覆盖而无法观察的情况，严重影响检出率和工作效率。

发明内容

根据第一方面，在一实施例中，提供一种增菌液，所述增菌液含有如下组分：马铃薯葡萄糖水溶液、龙胆紫、氯霉素、多黏菌素B、脱氢乙酸钠。

根据第二方面，在一实施例中，提供第一方面所述增菌液的制备方法，包括：按配方量将马铃薯葡萄糖水溶液、龙胆紫、氯霉素、多黏菌素B、脱氢乙酸钠混合，制得所述增菌液。

根据第三方面，在一实施例中，提供第一方面所述增菌液在检测唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(椰毒假单胞菌酵米面亚种)中的用途。

根据第四方面，在一实施例中，提供第一方面所述增菌液在筛选唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(椰毒假单胞菌酵米面亚种)中的用途。

根据第五方面，在一实施例中，提供第一方面所述增菌液在培养唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(椰毒假单胞菌酵米面亚种)中的用途。

依据上述实施例的增菌液及其在检测唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(椰毒假单胞菌酵米面亚种)中的用途，该增菌液对目标菌株具有良好的增菌效果，同时能够有效抑制日常检测过程中出现频率较高的非目标菌的生长，降低非目标菌的干扰，提高目标菌的检出率以及工作效率。本发明制备工艺简单、成本低廉、可操作性强，适用于各类食品中唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(椰毒假单胞菌酵米面亚种)的增菌。

附图说明

图1为非目标混合菌在TSA平板上的生长情况图；

图2为不同增菌液在mPDA平板上生长情况图；