[发明专利]一种β-乳球蛋白的抗原表位肽、完全抗原、抗体以及测定β-乳球蛋白残留量的方法有效

专利信息
申请号: 202110602455.0 申请日: 2021-05-31
公开(公告)号: CN113549141B 公开(公告)日: 2023-03-28
发明(设计)人: 丛艳君;刘迪 申请(专利权)人: 北京工商大学
主分类号: C07K14/47 分类号: C07K14/47;C07K16/18;G01N33/68;G01N33/577
代理公司: 北京易捷胜知识产权代理有限公司 11613 代理人: 齐胜杰
地址: 100048*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 球蛋白 抗原 表位肽 完全 抗体 以及 测定 残留 方法
【权利要求书】:

1.一种β-乳球蛋白的抗原表位肽,其特征在于,所述抗原表位肽的氨基酸序列为CGAQALIVTQTMKGLDIQKVAGTWYS。

2.一种根据权利要求1所述的抗原表位肽和牛血清蛋白偶联得到的完全抗原。

3.根据权利要求2所述的完全抗原,其特征在于,所述完全抗原通过戊二醛法偶联制备。

4.一种多克隆抗体,其特征在于,所述多克隆抗体以权利要求2或权利要求3所述的完全抗原为抗原经过免疫兔或羊制备得到。

5.一种测定β-乳球蛋白残留量的方法,其特征在于,包括如下步骤:

S1:合成β-乳球蛋白作用表位肽,所述β-乳球蛋白作用表位肽的氨基酸序列为CGAQALIVTQTMKGLDIQKVAGTWYS;

S2:将步骤S1合成的β-乳球蛋白作用表位肽与牛血清蛋白进行偶联,制备得到完全抗原;

S3:以步骤S2制备的完全抗原为抗原,制备得到单克隆抗体;

或者:

以步骤S2制备的完全抗原为抗原,制备得到多克隆抗体;

S4:以步骤S3制备得到的单克隆抗体或者多克隆抗体为一抗,采用间接竞争ELISA方法检测不同蛋白酶水解β-乳球蛋白的水解液中β-乳球蛋白残留量。

6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,步骤S4中,采用间接竞争ELISA方法检测时,

如果以作用表位的完全抗原免疫制备的单抗为测定用的一抗,其稀释倍数为5000-10000倍;酶标二抗的稀释倍数为500-2000倍;

如果以作用表位的完全抗原免疫制备的多克隆抗体为测定用的一抗,其稀释倍数为200-300倍;酶标二抗的稀释倍数为500-2000倍。

7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,步骤S4中,

所述酶标二抗为HRP-羊抗鼠IgG或者HRP-羊抗兔IgG。

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