[发明专利]一种牙髓干细胞外泌体及其制备方法和应用在审

专利信息
申请号: 202110601193.6 申请日: 2021-05-31
公开(公告)号: CN113322230A 公开(公告)日: 2021-08-31
发明(设计)人: 杨德琴;窦磊;艾晓青 申请(专利权)人: 重庆医科大学附属口腔医院
主分类号: C12N5/0775 分类号: C12N5/0775;A61L27/38
代理公司: 重庆强大凯创专利代理事务所(普通合伙) 50217 代理人: 伍琴琴
地址: 401147 *** 国省代码: 重庆;50
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摘要:
搜索关键词: 一种 牙髓 干细胞 外泌体 及其 制备 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种牙髓干细胞外泌体的制备方法,其特征在于:将牙髓间充质细胞悬液与低熔点琼脂糖溶液混合,获得混合物;所述混合物中的牙髓间充质细胞经过预培养和诱导培养,获得含有外泌体的上清液。

2.根据权利要求1所述的一种牙髓干细胞外泌体的制备方法,其特征在于:牙髓间充质细胞悬液与低熔点琼脂糖溶液的体积比为1:1。

3.根据权利要求2所述的一种牙髓干细胞外泌体的制备方法,其特征在于:所述低熔点琼脂糖溶液中低熔点琼脂糖的质量分数为1.5%。

4.根据权利要求3所述的一种牙髓干细胞外泌体的制备方法,其特征在于:所述牙髓间充质细胞悬液中牙髓间充质细胞的浓度为106个/ml。

5.根据权利要求4所述的一种牙髓干细胞外泌体的制备方法,其特征在于:所述预培养的方法如下:待所述混合物结胶后,加入含有胎牛血清的α-MEM培养基,然后培养2-3天。

6.根据权利要求5所述的一种牙髓干细胞外泌体的制备方法,其特征在于:所述诱导培养的方法如下:预培养结束后,将含有胎牛血清的α-MEM培养基替换为不含胎牛血清的α-MEM培养基,然后培养24-48h,收集上清。

7.根据权利要求6所述的一种牙髓干细胞外泌体的制备方法,其特征在于:所述牙髓间充质细胞悬液中含有P3-P6代牙髓间充质细胞。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的一种牙髓干细胞外泌体的制备方法所制备的外泌体。

9.根据权利要求8所述的一种牙髓干细胞外泌体的制备方法所制备的外泌体,其特征在于:在所述外泌体中,hsa-miR-302a-3p、hsa-miR-302b-3p、hsa-miR-302c-3p、hsa-miR-302d-3p、hsa-miR-24-3p、hsa-miR-27b-3p、hsa-miR-34a-5p和hsa-miR-100-5p的含量上调。

10.根据权利要求9所述的外泌体在制备组织再生修复材料中的应用。

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