[发明专利]一种牙髓干细胞外泌体及其制备方法和应用在审
申请号: | 202110601193.6 | 申请日: | 2021-05-31 |
公开(公告)号: | CN113322230A | 公开(公告)日: | 2021-08-31 |
发明(设计)人: | 杨德琴;窦磊;艾晓青 | 申请(专利权)人: | 重庆医科大学附属口腔医院 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775;A61L27/38 |
代理公司: | 重庆强大凯创专利代理事务所(普通合伙) 50217 | 代理人: | 伍琴琴 |
地址: | 401147 *** | 国省代码: | 重庆;50 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 牙髓 干细胞 外泌体 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种牙髓干细胞外泌体的制备方法,其特征在于:将牙髓间充质细胞悬液与低熔点琼脂糖溶液混合,获得混合物;所述混合物中的牙髓间充质细胞经过预培养和诱导培养,获得含有外泌体的上清液。
2.根据权利要求1所述的一种牙髓干细胞外泌体的制备方法,其特征在于:牙髓间充质细胞悬液与低熔点琼脂糖溶液的体积比为1:1。
3.根据权利要求2所述的一种牙髓干细胞外泌体的制备方法,其特征在于:所述低熔点琼脂糖溶液中低熔点琼脂糖的质量分数为1.5%。
4.根据权利要求3所述的一种牙髓干细胞外泌体的制备方法,其特征在于:所述牙髓间充质细胞悬液中牙髓间充质细胞的浓度为106个/ml。
5.根据权利要求4所述的一种牙髓干细胞外泌体的制备方法,其特征在于:所述预培养的方法如下:待所述混合物结胶后,加入含有胎牛血清的α-MEM培养基,然后培养2-3天。
6.根据权利要求5所述的一种牙髓干细胞外泌体的制备方法,其特征在于:所述诱导培养的方法如下:预培养结束后,将含有胎牛血清的α-MEM培养基替换为不含胎牛血清的α-MEM培养基,然后培养24-48h,收集上清。
7.根据权利要求6所述的一种牙髓干细胞外泌体的制备方法,其特征在于:所述牙髓间充质细胞悬液中含有P3-P6代牙髓间充质细胞。
8.根据权利要求1-7中任一项所述的一种牙髓干细胞外泌体的制备方法所制备的外泌体。
9.根据权利要求8所述的一种牙髓干细胞外泌体的制备方法所制备的外泌体,其特征在于:在所述外泌体中,hsa-miR-302a-3p、hsa-miR-302b-3p、hsa-miR-302c-3p、hsa-miR-302d-3p、hsa-miR-24-3p、hsa-miR-27b-3p、hsa-miR-34a-5p和hsa-miR-100-5p的含量上调。
10.根据权利要求9所述的外泌体在制备组织再生修复材料中的应用。
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