[发明专利]一种重力牵拉可封装微管神经修复支架的制备方法

说明书

本发明公开了一种重力牵拉可封装微管神经修复支架的制备方法，具体按照以下步骤实施：步骤1、制备微管纤维外壳材料、内层溶液。步骤2、利用微管纤维外壳材料、内层溶液，调节重力牵拉设备；步骤3、利用重力牵拉设备采集纤维；步骤4、利用采集的纤维构建定向微管纤维材料；利用定向微管纤维材料构建定向微管神经支架，完成神经修复支架的制备。解决了现有技术中存在的神经支架拓扑引导能力差的问题。

技术领域

本发明属于医学组织工程修复材料技术领域，涉及一种重力牵拉可封装微管神经修复支架的制备方法。

背景技术

周围神经损伤是骨科最常见的损伤之一。其修复不良，可导致受损神经区域的感觉和运动功能丧失，甚至终生残疾。尽管周围神经损伤后能够自发再生，但周围神经损伤后再生的临床修复效果不满意。对于短节段的神经缺损，临床上可以通过断端吻合的方案进行修复，但对于长节段神经缺损，目前多应用自体神经移植的方法进行修复。然而，自体神经移植导致供区神经支配区功能丧失、供体与损伤神经大小匹配不佳等问题，限制了自体神经移植的临床应用。

随着神经生物材料和组织工程技术的大力发展，周围神经修复支架为神经修复提供了一个良好的治疗方案。目前，已有商品化的神经修复支架，例如Neurotube、NeuroGen、Neuromatrix等，但这些支架存在很多问题，如缺乏内部三维结构、缺乏能够引导神经再生的仿生拓扑结构、无法封装促神经再生的活性因子，限制了其临床应用。

发明内容

本发明的目的是提供一种重力牵拉可封装微管神经修复支架的制备方法，解决了现有技术中存在的神经支架拓扑引导能力差的问题。

本发明所采用的技术方案是，一种重力牵拉可封装微管神经修复支架的制备方法，具体按照以下步骤实施：

步骤1、制备微管纤维外壳材料、内层溶液；

步骤2、利用微管纤维外壳材料、内层溶液，调节重力牵拉设备；

步骤3、利用重力牵拉设备采集纤维；

步骤4、利用采集的纤维构建定向微管纤维材料；利用定向微管纤维材料构建定向微管神经支架，完成神经修复支架的制备。

本发明的特点还在于：

步骤1中制备微管纤维外壳材料具体按照以下实施：将聚己内脂颗粒混合于三氯甲烷与甲醇的混合液中，其中三氯甲烷和甲醇的质量比为6:1-2:1,使聚己内脂溶解终浓度为0-50wv.％。

步骤1中制备内层溶液具体按照以下实施：将羧基壳聚糖加入浓度为1mg/mL牛血清白蛋白的溶液中制备牵拉工作液，将VEGF加入工作液中，使得VEGF浓度达到0-200ng/mL，得到内层溶液。

步骤2具体按照以下实施：将同轴牵拉针的针口向下固定于实验架上，分别用10ml注射器抽取内层溶液和外壳材料，将含有内层溶液的注射器连接于针头内管，含有外壳材料的注射器连接于针头的外管；分别设定内层溶液注射器和外层溶液注射器射速度，使其配比达到1:1-1:20。

步骤3具体按照以下实施：调整同轴牵拉针与底部面板的距离、接收框距离底部面板的距离，采集框固定于手动三轴滑块模组，其中X轴为高精度螺杆步进手动摇杆，可以精确平移采集框达到2微米；Y轴为可以调整高低杆；Z轴为滑块，手动推动快速向前贴近重力牵拉形成的微管纤维；当同轴牵拉针开始挤出材料时，随着液滴逐渐增加，材料的粘滞力难以阻止液滴的拉力时，液滴坠落，并形成具有同轴结构的纤维；纤维表面的有机溶剂快速挥发，形成稳定固体封装结构，此时，安装有接收框的滑轨迅速划过纤维，在运动末端切断纤维后，接收框完成一根纤维的采集；手动调整左右步进运动区间，再按照上述循环往复接收一根纤维的采集，直到形成间距可控、具有平面结构或者立体结构的纤维膜或纤维束。