[发明专利]一种新型冠状病毒的mRNA疫苗

说明书

本发明公开了一种新型冠状病毒的mRNA疫苗。本发明提供的疫苗，其活性成分为mRNA，如序列表的序列6所示。本发明还保护TF‑RBD蛋白，如序列表的序列2所示。本发明的发明人通过一系列序列设计和序列优化得到了特异DNA分子，进一步构建了特异重组质粒，将特异重组质粒进行体外转录，可以得到多聚化TF‑RBD mRNA。进一步的，发明人制备了负载TF‑RBD mRNA的脂质纳米粒。本发明对于新型冠状病毒的防控具有重大的应用推广价值。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种新型冠状病毒的mRNA疫苗。

背景技术

冠状病毒是一种有囊膜的正义RNA病毒，属于冠状病毒科冠状病毒属。一些冠状病毒严重威胁人类健康，如导致严重呼吸综合征（SARS）暴发的SARS-CoV和导致中东呼吸综合征（MERS）暴发的MERS-CoV，以及导致新冠病毒肺炎（COVID-19）的SARS-CoV-2。抵御病毒感染最有效的方式就是疫苗接种，目前世界各国都在加紧研发针对新型冠状病毒及其它冠状病毒的疫苗。

信使RNA，即messenger RNA（mRNA）是经由DNA模板链转录而来，其序列与编码链相同，与模板链互补。与原核生物不同，真核生物中携带遗传信息的mRNA由编码蛋白的外显子和无编码功能的内含子间隔排列组成。只有经过正确修饰、剪接的成熟mRNA才能作为信息模板转运到细胞质中进一步翻译产生蛋白质。

mRNA综合其各方面的优势，发展mRNA疫苗具有非常好的应用前景。先前的研究表明，针对埃博拉病毒、寨卡病毒、流感病毒和癌症的mRNA疫苗也被试图开发和诱导安全可接受的有效保护性免疫应答。基于mRNA修饰和递送工具的发展，mRNA疫苗成为传染病防治领域的重要手段。其优势在于一旦获得病毒抗原序列，可在数周内迅速设计和制造具有临床规模的mRNA疫苗，使其在应对大流行暴发方面非常具有吸引力。

发明内容

本发明的目的是提供一种新型冠状病毒的mRNA疫苗。

本发明提供了一种新型冠状病毒疫苗，其活性成分为mRNA；所述mRNA翻译得到TF-RBD蛋白。

本发明还保护TF-RBD蛋白。

以上任一所述TF-RBD蛋白自N端至C端依次包括如下元件：tPA信号肽、S-RBD区段、柔性linker、三聚体motif、ferritin蛋白；所述S-RBD区段为SARS-CoV-2的S蛋白的RBD区域。

以上任一所述TF-RBD蛋白自N端至C端依次由如下元件组成：tPA信号肽、S-RBD区段、柔性linker、三聚体motif、ferritin蛋白；所述S-RBD区段为SARS-CoV-2的S蛋白的RBD区域。

tPA信号肽如序列表的序列2中第1-21位氨基酸残基所示。

S-RBD区段如序列表的序列2中第22-244位氨基酸残基所示。

柔性linker如序列表的序列2中第245-247位氨基酸残基所示。

三聚体motif如序列表的序列2中第248-274位氨基酸残基所示。

ferritin蛋白如序列表的序列2中第275-440位氨基酸残基所示。

TF-RBD蛋白具体如序列表的序列2所示。

本发明还保护TF-RBD蛋白的编码基因。

TF-RBD蛋白的编码基因具体如序列表的序列3所示。

本发明还保护一种mRNA（TF-RBD mRNA），如序列表的序列6所示。

TF-RBD mRNA的制备方法包括如下步骤：取特异重组质粒，采用限制性内切酶XhoI进行酶切并回收线性化质粒，然后通过体外转录得到TF-RBD mRNA。