[发明专利]一种含植物促生菌的生物有机无机三元复混肥及其制备方法

权利要求书

1.一种含植物促生菌的生物有机无机三元复混肥，其特征在于，所述生物有机无机三元复混肥包括以下组分：碎秸秆、鸡粪、高温腐熟菌剂、植物促生菌剂、化学肥料；

所述高温腐熟菌剂包括嗜热脂肪地芽胞杆菌、米曲霉和地衣芽胞杆菌，将嗜热脂肪地芽胞杆菌、米曲霉、地衣芽胞杆菌分别在相应的培养基上扩大培养，分别制成相应的固体菌剂，将嗜热脂肪地芽胞杆菌固体菌剂、米曲霉固体菌剂和地衣芽胞杆菌固体菌剂混合制成高温腐熟菌剂；

所述植物促生菌剂由胶冻样类芽胞杆菌在相应的培养基上扩大培养制成；

所述化学肥料为含氮、磷、钾元素的无机化肥。

2.根据权利要求1所述的一种含植物促生菌的生物有机无机三元复混肥，其特征在于：所述嗜热脂肪地芽胞杆菌、米曲霉、地衣芽胞杆菌和胶冻样类芽胞杆菌均来自中国农业微生物菌种保藏管理中心；其中，嗜热脂肪地芽胞杆菌保藏编号为ACCC 10253，米曲霉保藏编号为ACCC 31491，地衣芽胞杆菌保藏编号为ACCC 19744，胶冻样类芽胞杆菌保藏编号为ACCC 10090。

3.根据权利要求1所述的一种含植物促生菌的生物有机无机三元复混肥，其特征在于：所述化学肥料中氮、磷、钾元素的含量分别为N10％、P7％、K8％。

4.一种制备如权利要求1所述的含植物促生菌的生物有机无机三元复混肥的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)嗜热脂肪地芽胞杆菌固体菌剂的制备

用无菌生理盐水洗涤嗜热脂肪地芽胞杆菌保存斜面，至无菌三角瓶中摇匀即成嗜热脂肪地芽胞杆菌菌悬液；将嗜热脂肪地芽胞杆菌菌悬液接种于LB培养基中，60℃，200rpm培养36h得到嗜热脂肪地芽胞杆菌种子液；将10％嗜热脂肪地芽胞杆菌种子液接种到发酵培养基中，60℃，200rpm培养48h得到嗜热脂肪地芽胞杆菌发酵液；将嗜热脂肪地芽胞杆菌发酵液与灭菌麸皮按1:1比例混合晾干，制得含菌量为6-8×10⁹CFU/g的嗜热脂肪地芽胞杆菌固体菌剂；

(2)米曲霉固体菌剂的制备

用无菌生理盐水洗涤米曲霉保存斜面，至无菌三角瓶中摇匀即成米曲霉菌悬液；将米曲霉菌悬液接种于YPD培养基中，28℃，200rpm培养48h得到米曲霉种子液；将10％米曲霉种子液接种到PDA培养基中，28℃，200rpm培养72h得到米曲霉发酵液；将米曲霉发酵液与灭菌麸皮按1:1比例混合晾干，制得含菌量为3-5×10⁹CFU/g的米曲霉固体菌剂；

(3)地衣芽胞杆菌固体菌剂的制备；

用无菌生理盐水洗涤地衣芽胞杆菌保存斜面，至无菌三角瓶中摇匀即成地衣芽胞杆菌菌悬液；将地衣芽胞杆菌菌悬液接种于LB培养基中，30℃，200rpm培养36h得到地衣芽胞杆菌种子液；将10％地衣芽胞杆菌种子液接种到发酵培养基中，30℃，200rpm培养48h得到地衣芽胞杆菌发酵液；将地衣芽胞杆菌发酵液与灭菌麸皮按1:1比例混合晾干，制得含菌量为5-7×10⁹CFU/g的地衣芽胞杆菌固体菌剂；

(4)将上述制备的嗜热脂肪地芽胞杆菌固体菌剂、米曲霉固体菌剂和地衣芽胞杆菌固体菌剂按照1:1:1的比例混合，制作成一次发酵用复合菌剂；

(5)植物促生菌剂的制备

用无菌生理盐水洗涤胶冻样类芽胞杆菌保存斜面，至无菌三角瓶中摇匀即成胶冻样类芽胞杆菌菌悬液；将胶冻样类芽胞杆菌菌悬液接种于无氮培养基中，30℃，200rpm培养36h得到胶冻样类芽胞杆菌种子液。将10％胶冻样类芽胞杆菌种子液接种到有氮培养基中，30℃，200rpm培养72h得到胶冻样类芽胞杆菌发酵液；将胶冻样类芽胞杆菌发酵液与灭菌草炭按1:1比例混合晾干，制得含菌量为7-9×10⁸CFU/g植物促生菌剂；

(6)将秸秆自然晾干后粉碎得到碎秸秆，将鸡粪自然晾干至一定的水分含量，然后将鸡粪和碎秸秆按照质量比为7:3的比例混匀，得到发酵物料；

(7)向发酵物料中加入一次发酵用复合菌剂进行一次高温发酵，一次发酵用复合菌剂的添加量为发酵物料质量的0.3-0.5％，翻堆次数为3-4天一次，一次高温发酵时间15天；当发酵进行到温度下降至45℃以下时，向物料中加入植物促生菌剂进行二次发酵，植物促生菌剂的添加量为发酵物料质量的0.4-0.6％，每天翻堆一次，二次发酵5天，得到含植物促生菌有机肥；

(8)将步骤(7)中制得的含植物促生菌有机肥与化学肥料进行混合，制成生物有机无机三元复混肥料。