[发明专利]一种止血材料及其制备方法

说明书

本发明公开了一种止血材料及其制备方法。将动物组织脱细胞处理后，冻干、粉碎、胃蛋白酶进一步消化，之后使用低浓度PBS处理，后处理得到止血材料。本发明一些实例的止血材料，具有良好的生物相容性和止血性能，制备工艺更为简单，成本低。本发明一些实例的制备方法，不需要进行交联处理，操作简便，成功率高，用时短。本发明一些实例的制备方法，可以方便地通过控制PBS的浓度调控止血材料的凝血时间。

技术领域

本发明涉及医用材料，具体涉及一种止血材料及其制备方法。

背景技术

在创伤还是手术过程中，止血是都是非常关键的一步，及时有效的止血能够加速伤口的愈合，甚至保证生命安全。对于不同程度的出血，所采取的止血技术也会不一样，严重的出血可能需要夹闭或者直接阻塞血管，而对于更常见的轻度创伤，手术切割伤、术后并发症等所致的出血，使用外部止血材料会更加适用。

现有技术已经开发出多种止血材料，并且在不断被改进。目前止血材料中，主要分无机止血材料和天然止血材料，用于制备止血材料的无机成分主要是沸石、粘土、高岭土、介孔硅等，鉴于生物相容性和降解性差的问题，天然成分的止血材料更受欢迎，主要由壳聚糖、纤维素、明胶、淀粉、海藻酸钠等组成。大多数是将几种成分混合做成多孔止血海绵，或者将成分经过改性的方式，或加到上无纺布或者纱布上等方式，增强材料整体的凝血效果。

去细胞支架直接来源于机体组织，机体器官或组织取下来之后，经过洗涤剂等处理之后，去除细胞，剩余的支架又称去细胞支架，主要保留着细胞外基质的三维结构和活性蛋白成分，为细胞粘附、增殖、迁移提供了很好的微环境，因此，被研究者大量用于再生领域的研究，其最大的优势就是促再生性能和生物相容性，而在去细胞支架的基础上，通过一些化学或物理处理，强化或者支架材料的力学性能，保留其本身优秀的促再生能力，能扩大其应用场景。

Ventrua等人将猪皮切成小片，暴露于胰蛋白酶溶液中，用十二烷基硫酸钠、Triton X-100进行洗涤，脱细胞之后，样品用蒸馏水洗涤并冻干，研磨后保存在-20℃下备用，研磨后的ECM粉在胃蛋白酶缓冲液中溶解48h，得到均匀的溶液。均质溶液的pH用1MNaOH中和。匀浆中和后的ECM溶液用PBS稀释得到10% (HECM10)、15% (HECM15)和20%(HECM20)浓度(w/v)。ECM溶液置于5mm × 5mm的塑料模具中，并与EDC/NHS (50mmol:20mmol)溶液交联24小时。样品在冷冻干燥器中冷冻干燥48小时，得到多孔海绵，该海绵具有止血的潜力，能够吸附血小板，体内实验也证明其明显缩短了鼠尾和兔股动脉出血时间。这是唯一一篇将去细胞猪皮用作止血材料基材的研究。

现有的脱细胞基质止血材料，制备工艺普遍复杂，交联剂的加入在一定程度上增加了细胞毒性，且效果也有待进一步提高。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的至少一个不足，提供一种新型的止血材料及其制备方法。

本发明所采取的技术方案是：

一种止血材料，其制备方法包括如下步骤：

S1) 取动物组织，进行脱细胞处理；

S2) 将脱细胞处理后的动物组织清洗干净，冻干后粉碎，得组织粉；

S3) 将组织粉加入溶液中，加入胃蛋白酶消化处理8～36 h；

S4) 消化处理完成后，中止酶解反应，得消化液；

S5) 在消化液中加入磷酸盐缓冲液，使消化液中磷酸盐缓冲液的浓度为0～0.003M，后处理得到止血材料。

在一些实例中，所述动物组织为富含胶原蛋白的动物组织。富含胶原蛋白的动物组织在处理后往往具有更好的机械性能，同时其来源也较为丰富同时易于处理，是更佳的选择。