[发明专利]一种碳酸盐矿化菌联合羟基磷灰石固化重金属的方法

权利要求书

1.一种微生物诱导碳酸盐沉积固化重金属的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)高密度碳酸盐矿化菌液的制备：在无菌条件下，将碳酸盐矿化菌接种到固体培养基中活化培养，再将碳酸盐矿化菌转移至已灭菌的含尿素液体培养基中培养，培养完成后离心，用水冲洗菌体，得到高密度菌液；所述碳酸盐矿化菌分别为为施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)，枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、巴氏芽孢杆菌(Bacilluspasteurii)。

(2)将步骤(1)中得到的三种高密度菌液混合后接种到含重金属离子的水体中，同时投加尿素和钙化物，搅拌培养进行固化反应即可沉积固化重金属。

2.根据权利要求1所述的一种微生物诱导碳酸盐沉积固化重金属的方法，其特征在于，步骤(1)中，施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)为ATCC 17588，枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)为ATCC 6633、巴氏芽孢杆菌(Bacillus pasteurii)为ATCC 11859。

3.根据权利要求1所述的一种微生物诱导碳酸盐沉积固化重金属的方法，其特征在于，步骤(1)中，固体培养基成分质量比例：1％蛋白胨、0.3％牛肉膏浸出粉、0.5％氯化钠、1％琼脂，余量为水，pH为7.0±0.2；含尿素液体培养基成分质量比例：1％蛋白胨、0.3％牛肉膏浸出粉、0.5％氯化钠、2％尿素，余量为水，pH为7.0±0.2。

4.根据权利要求1所述的一种微生物诱导碳酸盐沉积固化重金属的方法，其特征在于，步骤(1)中，培养pH为6.5～7.5，温度为30～35℃，菌体培养时间24～48h。

5.根据权利要求1所述的一种微生物诱导碳酸盐沉积固化重金属的方法，其特征在于，步骤(1)中，培养24h后以4000r/min离心10min，并用无菌0.9％生理盐水冲洗2～3次，重复离心冲洗3次后，使菌体重悬于无菌生理盐水，细菌密度为1×10⁸～1×10⁹CFU/mL，得到高密度菌液。

6.根据权利要求1所述的一种微生物诱导碳酸盐沉积固化重金属的方法，其特征在于，步骤(2)中，三种高密度菌液按体积比1:1:1混合。

7.根据权利要求1所述的一种微生物诱导碳酸盐沉积固化重金属的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述重金属离子为Cd²⁺或Pb²⁺或两者的混合。

8.根据权利要求1所述的一种微生物诱导碳酸盐沉积固化重金属的方法，其特征在于，步骤(2)中，尿素、钙化物的添加顺序为：先添加尿素，后添加钙化物。

9.根据权利要求1所述的一种微生物诱导碳酸盐沉积固化重金属的方法，其特征在于，步骤(2)中，钙化物为羟基磷灰石、乙酸钙、氯化钙或硝酸钙，培养体系中钙盐投加量为为1.0～5.0g/L。

10.根据权利要求1所述的一种微生物诱导碳酸盐沉积固化重金属的方法，其特征在于，步骤(2)中，钙化物为羟基磷灰石。