[发明专利]一种准确、快速测定黄芩药材及其制品中总黄酮含量的方法

说明书

本发明公开了一种准确、快速测定黄芩药材及其制品中总黄酮含量的方法，该方法能够在快速测定黄芩总黄酮的同时，有效降低杂质组分的干扰，使得测定结果更加准确。具体的方法是向黄芩提取物中加入铝盐溶液，在酸性条件下，Al³⁺与黄酮形成酸稳定配合物，溶液黄色加深，然后在330nm处测定吸光度值，以黄芩苷为对照品，计算黄芩总黄酮的含量。该方法通过实验发现黄芩总黄酮经铝盐显色后，在330nm处测定吸光度值能有效避开杂质干扰，使结果更加准确。对该方法进行了一系列的方法学验证，并与高效液相色谱法测定结果比较，证明该方法准确可靠，可用于黄芩总黄酮含量的测定。

技术领域

本发明涉及测定黄芩总黄酮含量的方法。

背景技术

黄芩(ScutellariabaicalensisGeorgi)为唇形科植物，其干燥根为我国传统中药，具有清热燥湿，泻火解毒，止血，安胎等功效。黄酮类化合物为黄芩中的主要活性成分，主要包括苷类(黄芩苷、汉黄芩苷)和苷元类(黄芩素、汉黄芩素)。其中黄芩苷是黄芩中含量最高的黄酮类成分，约占黄芩药材重量的9％以上。

目前，已经报道了许多关于黄芩中黄酮类化合物测定方法的研究，涉及的方法主要有液相色谱法、近红外光谱法、分光光度法等。下面对这三种方法的研究现状及优缺点进行概述：

1、液相色谱法：

液相色谱法是黄芩黄酮分析的经典方法之一，《中国药典》2015版第一部中将液相色谱法作为黄芩苷含量检测的标准方法，即：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-水-磷酸(47:53:0.2)为流动相，检测波长为280nm。另外有许多科研人员对检测条件进行了研究，形成了许多利用液相色谱技术检测黄芩有效成分的方法。如《滨州医学院学报》2020年2月第43卷第一期文章“同时测定黄芩提取液中黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素含量的高效液相色谱方法的建立”，使用C₁₈色谱柱，流动相为乙腈：含0.05％磷酸水溶液(25:75)，流速1mL/min，检测波长275nm，在该检测条件下，黄芩中的这三种成分分离良好，取得了较好的检测结果。专利“CN 201210150241-一种从黄芩根中提取黄芩苷和黄芩素的方法”、专利“CN200910075407-黄芩中黄芩苷及黄芩总苷元同时提取分离工艺”等专利中同样采用高效液相色谱法检测黄芩中的黄酮类化合物。

液相色谱法在诸多方法中相对准确，具有更高的灵敏度，且通过对复杂组分进行分离，能够精确测定某单一组分的含量。但液相色谱法需要复杂昂贵的仪器，在使用过程中需要消耗大量有毒有害的有机溶剂。仪器在进样前需要长时间排气泡、走平基线，在分析完毕后还需长时间的冲洗色谱柱，所以现在的液相色谱技术还存在耗时长的缺点。

2、近红外光谱法：

近红外光谱是介于可见光和中红外之间的电磁辐射波，通过扫描样品的近红外光谱，可以得到样品中有机分子含氢基团的特征信息，是一种快速、无损的检测手段，在食品、药品等领域具有广泛的应用前景。专利“CN201610462580-一种黄芩颗粒及其中药制剂”中使用近红外光谱法对黄芩颗粒的质量进行控制，首先采集大量的样品原始吸收光谱图，然后对这些样品中的有效成分进行测定得到实测值，接着采用一系列的化学计量学方法对原始光谱图进行处理，最后构建出近红外光谱数据与实测值之间的定量模型。该专利中所构建的定量模型预测值与实测值之间的偏差较小，取得了比较好的结果。但精密的近红外光谱仪价格昂贵，便宜的便携式光谱仪往往达不到好的预测结果，而且该方法需要经过复杂的数学运算，对使用人员有严苛的知识要求，使得该方法的普及难以实现。

3、分光光度法：