[发明专利]桑树亚精胺合成酶基因MnSPDS2及其应用

说明书

本发明公开了一种桑树亚精胺合成酶基因MnSPDS2在检测抗干旱能力方面的应用，包括：桑树亚精胺合成酶基因MnSPDS2的核苷酸序列；进一步地本发明要求保护一种桑树亚精胺合成酶基因MnSPDS2的制备方法、一种桑树亚精胺合成酶基因MnSPDS2的应用、一种桑树亚精胺合成酶基因MnSPDS2的荧光定量检测引物组、一种桑树亚精胺合成酶MnSPDS2、一种检测桑树抗干旱能力的方法。本发明克隆了桑树亚精胺合成酶基因MnSPDS2，并通过逆境胁迫实验初步了解了桑树亚精胺合成酶基因MnSPDS2的功能，从而为桑树的抗逆性改良奠定了基础。

技术领域

本发明涉及分子生物学技术领域。更具体地说，本发明涉及桑树亚精胺合成酶基因MnSPDS2在检测抗干旱能力方面的应用。

背景技术

桑树是重要的经济作物，属于桑科桑属，在我国不同地方均有种植。桑叶不仅用于养蚕，桑树中还含有很多有益成分，如酚类物质、生物碱、多糖等。桑树中的DNJ和多糖都有降血糖的功能。不仅如此，桑树还是重要的生态林树种，能在干旱和盐碱地区种植，从而可以用于石漠化和盐碱化土地的治理，同时还能用于重金属污染土壤的修复，所以提高桑树对逆境胁迫的耐受力可以使桑树更充分地发挥其价值。亚精胺(spermidine，SPD)可以作为信号分子参与植物响应逆境胁迫。在SPD的生物合成中，亚精胺合成酶(spermidinesynthase，SPDS)是催化腐胺合成SPD的关键酶。目前为止，还未见有亚精胺能否诱导桑树产生对逆境胁迫抗性的相关研究和报道。本发明克隆鉴定了桑树SPDS基因，并通过逆境胁迫处理实验初步了解了桑树的SPDS功能,从而为桑树的抗逆性改良奠定了基础。

发明内容

本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。

本发明还有一个目的是提供一种桑树亚精胺合成酶基因MnSPDS2，其能够筛选出具有抗逆性的桑树幼苗，尤其可以筛选出具有抗干旱的桑树幼苗。

为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种桑树亚精胺合成酶基因MnSPDS2，其特征在于，所述桑树亚精胺合成酶基因MnSPDS2的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

本发明进一步要求保护所述的桑树亚精胺合成酶基因MnSPDS2的制备方法，包括以下步骤：

a、从桑树树叶中提取总RNA；

b、利用上游引物MnSPDS2-F和下游引物MnSPDS2-R，将总RNA反转录获得桑树亚精胺合成酶基因MnSPDS2。

本发明进一步要求保护所述的桑树亚精胺合成酶基因MnSPDS2的应用，所述桑树亚精胺合成酶基因MnSPDS2用于检测桑树抗干旱的能力。

本发明进一步要求保护一种桑树亚精胺合成酶基因MnSPDS2的荧光定量检测引物组，所述荧光定量检测引物组包括上游引物MnSPDS2-F和下游引物MnSPDS2-R，其序列分别如SEQIDNO.7和SEQIDNO.8所示。

本发明进一步要求保护一种桑树亚精胺合成酶MnSPDS2，所述桑树亚精胺合成酶MnSPDS2的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

本发明进一步要求保护一种检测桑树抗干旱能力的方法，包括以下步骤：

选取形态长势一致的桑树，将桑树根部浸入5％PEG6000的霍格兰营养液中一定时间；

采取桑树完全舒展的第3～5位叶片，每株桑树所采叶片混合为一个样品；

通过叶片提取包括桑树亚精胺合成酶基因MnSPDS2的cDNA溶液；