[发明专利]一种气凝胶固定化的微生物保藏方法有效
申请号: | 202110583444.2 | 申请日: | 2021-05-27 |
公开(公告)号: | CN113234712B | 公开(公告)日: | 2022-10-18 |
发明(设计)人: | 陈庆国;刘雨薇;刘梅;汪涛;竺柏康 | 申请(专利权)人: | 浙江海洋大学 |
主分类号: | C12N11/10 | 分类号: | C12N11/10;C12N11/084;C12N11/04;C12N1/04 |
代理公司: | 北京国翰知识产权代理事务所(普通合伙) 11696 | 代理人: | 李笑磊 |
地址: | 316002 浙江省舟*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 凝胶 固定 微生物 保藏 方法 | ||
本发明提供了一种气凝胶固定化的微生物保藏方法,属于微生物保藏技术领域,具体为利用包含海藻酸钠衍生物、聚乙烯醇的气凝胶作为固定化载体对微生物包埋后进行保藏,利用5‑羟基‑色氨酸对特定质量比的海藻酸钠、氧化海藻酸钠进行改性,可以明显提高气凝胶对微生物的包埋率,还能提高材料的强度,从而增加微生物的存活率;气凝胶中添加抗坏血酸钠和咖啡酰酒石酸能够增对微生物的保护作用,进一步提高微生物的存活率,并且能够提高微生物的保藏稳定性;保藏过程中,气凝胶制备过程中和微生物同时冻干,让微生物固定在气凝胶里,对微生物起到良好的保护作用,且步骤简单,生产成本减少。
技术领域
本发明属于微生物保藏技术领域,具体涉及一种气凝胶固定化的微生物保藏方法。
背景技术
微生物菌种是国家的重要资源,是从事微生物学以及生命科学研究的基本材料。近年来,越来越多的微生物菌种被利用到食品、医药、农业等领域,其质量的好坏直接关系到产品的质量和品质,因此,选择合适的保藏方法和技术是非常必要的。
为使微生物菌种能够良好的保存,最大程度地发挥作用,微生物菌种的保藏工作愈显重要。目前,微生物菌种的保藏方法主要包括定期移植法、矿物油保藏法、甘油保藏法、真空冷冻干燥保藏法、干燥保藏法以及液氮超低温保藏法。其中,定期移植法是目前实验室使用最多的短期保藏方法,其操作简单、成本较低,但菌种保存时间短,需定期移植;矿物油保藏法无需特殊设备,成本较低,但在菌种保藏过程中必须注意防火和污染;甘油保藏法不会破坏微生物菌种的原生质层和细胞膜,保藏时间较长;真空冷冻干燥保藏法适用范围广,微生物存活率高、保藏时间长,菌种稳定性高,但需要专用设备,成本较高;干燥保藏法保藏时间长,但适用范围窄;液氮超低温保藏法保藏时间长,菌种不易退化,但成本较高。目前常用的微生物菌种的保藏方法均存在一定的缺陷,需要进行改进。
固定化微生物技术是通过物理、化学手段将微生物固定在多孔载体内部的微生物菌种保藏方法。常见的包埋固定材料有聚乙烯醇、聚丙烯醇、聚乙烯乙二醇、琼脂、海藻酸钠等。气凝胶作为一种具有多孔结构的新型材料,具有超低密度、高比表面积、高孔隙率、低介电常数、高光学透过性、较低折射系数和低热导率等特殊的性质,使得气凝胶在吸附、分离、催化、光电传感器、生物医学、隔音隔热和环境治理等领域广泛应用,在包埋固定材料方面也具有极大的前景。但是,气凝胶也存在一定的缺陷,如韧性差、强度低、容易破碎等,这极大的限制了气凝胶的实际应用。因此,急需一种新型的气凝胶作为固定化载体用于微生物的保藏。
发明内容
针对现有技术的不足,本发明提供了一种微生物包埋量高、存活率高、稳定性好的气凝胶固定化的微生物保藏方法,生产成本大大降低,微生物在气凝胶中不易流失,保藏效果好。
为实现上述技术目的,本发明采取以下技术方案。
一种海藻酸钠衍生物在气凝胶固定化微生物保藏中的应用,所述海藻酸钠衍生物为5-羟基-色氨酸改性海藻酸钠。
所述海藻酸钠为质量比为1:0.28~0.35的海藻酸钠、氧化海藻酸钠。
所述应用包括提高气凝胶对微生物的包埋率。
所述应用还包括提高微生物的存活率。
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