[发明专利]苏云金芽孢杆菌Cry2Aa毒素的抗独特型单克隆抗体及应用

说明书

本发明涉及一种苏云金芽孢杆菌Cry2Aa毒素抗独特型单克隆抗体及应用，该抗独特型单克隆抗体以Cry2Aa毒素兔多克隆抗体的F(ab)’2片段作为免疫原，通过杂交瘤筛选获得，其重链及轻链的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1和SEQID NO.2所示；该抗独特型单克隆抗体可以竞争Cry2Aa毒素与其兔多克隆抗体的结合，也可与小菜蛾钙黏蛋白毒素结合区发生特异性结合，有潜力用于靶标昆虫中Cry2Aa毒素潜在受体鉴定以及其毒理学机制研究。

技术领域

本发明涉及一种苏云金芽孢杆菌Cry2Aa毒素抗独特型单克隆抗体及其应用，属于免疫学技术与植物保护技术交叉领域。

背景技术

1981年Yamamoto和McLaughlin首次从苏云金芽孢杆菌kurstaki亚种的伴孢晶体中分离得到分子量分别为130 kDa（P1）和66k Da（P2）两个杀虫蛋白组分，其中P1蛋白（Cry1类毒素）对鳞翅目害虫具有毒性，而P2蛋白（Cry2类毒素）对鳞翅目和双翅目害虫均有毒性（Yamamoto T, Mclaughlin RE. Isolation of a protein from the parasporalcrystal of Bacillus-Thuringiensis var kurstaki toxic to the mosquito larva,Aedes-Taeniorhynchus. Biochemical and Biophysical Research Communications.1981,103: 414-421）。1989年Widner等分别从苏云金杆菌kurstaki亚种中克隆和测序了cry2Aa和cry2Ab基因（当时命名为cryB1和cryB2基因），这两个基因均编码633个氨基酸，序列相似度达到87%，但是两者的杀虫谱存在较大差异（Widner WR, Whiteley HR. Twohighly related insecticidal crystal proteins of Bacillus thuringiensis subsp.kurstaki possess different host range specificities. Journal of Bacteriology,1989;171:965-974）。