[发明专利]一种烟草δ7-甾醇C5(6)-去饱和酶基因及其应用

权利要求书

1.一种烟草δ7-甾醇C5(6)-去饱和酶基因，其特征在于，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.根据权利要求1所述的烟草δ7-甾醇C5(6)-去饱和酶基因，其特征在于，烟草δ7-甾醇C5(6)-去饱和酶基因编码的蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

3.根据权利要求1或2所述的烟草δ7-甾醇C5(6)-去饱和酶基因，其特征在于，烟草δ7-甾醇C5(6)-去饱和酶基因的PCR扩增制备方法，包括如下步骤：

(1)提取基因组，并反转录为cDNA备用；

(2)设计PCR扩增用引物，并进行PCR扩增，具体引物序列设计如下：

NtSC5DL-F：5’-CATTCCTGCCGGAATCATG-3’，

NtSC5DL-R：5’-ATGTACTCAGAAAGTGATGGAAGG-3’。

4.根据权利要求3所述的烟草δ7-甾醇C5(6)-去饱和酶基因，其特征在于，在步骤(1)中提取基因组时，以烟草品种红花大金元叶片为样品。

5.一种烟草δ7-甾醇C5(6)-去饱和酶基因的应用，其特征在于，利用上述权利要求1至4中任一项的烟草δ7-甾醇C5(6)-去饱和酶基因，该基因表达的蛋白与植物叶片中甾醇含量相关，降低该蛋白表达后，叶片中总甾醇含量明显降低。

6.根据权利要求5所述的烟草δ7-甾醇C5(6)-去饱和酶基因的应用，其特征在于，利用基因沉默技术、或者基因超表达方法，通过调节烟草δ7-甾醇C5(6)-去饱和酶基因的表达量，来调节控制烟叶中甾醇含量情况。

7.根据权利要求6所述的烟草δ7-甾醇C5(6)-去饱和酶基因的应用，其特征在于，通过转基因技术、瞬时表达技术或基因组编辑技术，构建含有烟草δ7-甾醇C5(6)-去饱和酶基因的病毒诱导沉默载体、RNAi干涉载体、超表达载体或基因组编辑载体，转化烟草，筛选获得甾醇含量变化的烟草新品种。