[发明专利]双发射金团簇比率荧光探针及其制备方法和强力霉素的检测方法

权利要求书

1.一种双发射金团簇比率荧光探针检测强力霉素的方法，其特征在于，按照下述步骤进行：

（1）分别配制浓度梯度为0、0.2、2、5、10、15、20、30、40、60μM的强力霉素标准溶液；

（2）然后将不同浓度的强力霉素标准溶液与BSA-Au NCs溶液按体积比1:1混合，用1M的NaOH溶液调节混合液的pH调节至12，然后孵育2min,使用390nm作为激发波长，随着强力霉素浓度的增加，记录510nm和640nm处的荧光发射峰，通过510nm和640nm处的荧光强度的比值与加入的强力霉素的浓度进行线性拟合得到线性方程，建立强力霉素检测的标准曲线；

所述双发射金团簇比率荧光探针制备方法包括以下步骤：

（1）在剧烈搅拌下将5 mL，10 mM，37°C的HAuCl₄•4H₂O溶液添加到5 mL，50 mg/mL，37°C的牛血清白蛋白溶液中；

（2）2min后，逐滴加入1M 的NaOH溶液，使混合液的pH调节至12；

（3）在37℃水浴条件下持续搅拌12h，最终得到产物BSA-AuNCs。

2.一种采用如权利要求1所述的双发射金团簇比率荧光探针检测食品中强力霉素的方法，其特征在于，具体步骤如下：

（1）用1M NaOH和HCl调节0.01MPBS缓冲液的pH至12；

（2）分别将2mL牛奶、1g鸡蛋和1g蜂蜜放入10mL烧杯中，加入5mL，pH = 12，0.01 M的PBS缓冲液和1mL的5％三氯乙酸，涡旋10min并以10,000rpm离心10min后，取上清液，用1M NaOH将上清液的pH值调节至12，再以10,000rpm离心10min后，用0.22μm滤膜过滤所得的上清液，分别获得牛奶、鸡蛋、蜂蜜待测样品液；

（3）分别将1g猪肉和1g鸡肝放入10mL烧杯中，加入5mL，pH = 12，0.01M的PBS缓冲液，使用细胞粉碎仪搅拌至匀浆，然后加入1 mL的5％三氯乙酸，涡旋10min并以10,000 rpm离心10min，取上清液，用1 M NaOH将上清液的pH值调节至12，再以10,000 rpm离心10min后，用0.22μm滤膜过滤所得的上清液，分别获得猪肉、鸡肝待测样品液；

（4）将不同浓度的强力霉素加入到上述上清液中得到待测液待测样品液中；采用检测强力霉素的方法，扫描荧光光谱，根据检测出的510nm和640nm处的荧光强度的比值，并结合强力霉素检测的标准曲线拟合出线性方程，计算出实际食品样品中的强力霉素浓度。

3.双发射金团簇比率荧光探针在检测强力霉素中的应用， 该荧光探针制备方法如下：

（1）在剧烈搅拌下将5 mL，10 mM，37°C的HAuCl₄•4H₂O溶液添加到5 mL，50 mg/mL，37°C的牛血清白蛋白溶液中；

（2）2min后，逐滴加入1M 的NaOH溶液，使混合液的pH调节至12；

（3）在37℃水浴条件下持续搅拌12h，最终得到产物BSA-AuNCs。