[发明专利]一种甜叶菊叶片品质育种亲本选配方法

权利要求书

1.一种甜叶菊叶片品质育种亲本选配方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：

1)甜叶菊育种材料叶片所含化合物的检测

采用液质联用方法检测各育种材料叶片所含化合物，其中：液相分离体系为：以ACEUltracore 2.5Super C18柱为固定相，以含0.1％(v/v)甲酸(A)的纯净水和乙腈(B)为流动相，梯度洗脱条件为：0min 22.0％B，7.0min 26.5％B，12.0min 26.5％B，15.0min 38.0％B，19.0min 100％B，22.0min 100％B，22.01min 22.0％B；

质谱条件为：离子源为电喷雾电离源，负离子扫描模式，雾化气为纯度99.9％氮气，碰撞气为纯度99.999％氮气，雾化气压力为50psi，干燥气温度为350℃，干燥氮气流量为10.0L/min，毛细管电压为3500V，Mass range 100～5000m/z，碰裂电压175V；

2)甜叶菊育种材料叶片内检出化合物的定性分析

各育种材料叶片检出化合物的定性方法为：用包括但不限于保留时间、M-1峰、M-1+36峰、M+62峰、2M-1峰和3M-1峰等共分离特征峰对各检出化合物进行定性；其中M-1为化合物的分子离子峰，M-1+36为氯化物离子峰，M+62为[M+NO₃]-峰，2M-1为化合物的双分子离子峰，3M-1为化合物的三分子离子峰，当前述离子峰中除分子离子峰外，还同时出现2种及以上其他共分离特征峰时，即判定该化合物是真实存在的；

3)甜叶菊育种材料叶片内检出化合物的相对定量分析

育种材料叶片检出各化合物的相对定量所采用方法包括以下三步：

第一步是按质量大小由小到大统计源于该化合物的质量大于等于1/2M的裂解峰、M-1峰、M-1+36峰、M+62峰、质量介于M+62和2M-1之间的双分子裂解峰、2M-1峰、质量介于2M-1和3M-1之间的三分子裂解峰、3M-1峰及前述各峰的同位素峰所对应的峰面积；

第二步是以该化合物的质量大于等于1/2M的裂解峰、M-1峰、M-1+36峰、M+62峰等4类特征离子及其同位素峰的峰面积乘以该化合物的单倍分子量(M)进行折算；质量介于M+62和2M-1之间的双分子裂解峰和2M-1峰及这两类峰的同位素峰峰面积乘以该化合物的两倍分子量(2M)进行折算；质量介于2M-1和3M-1之间的三分子裂解峰和3M-1峰及这两类峰的同位素峰峰面积乘以该化合物的三倍分子量(3M)进行折算；

第三步是对前述第二步折算的各类离子峰及其同位素峰峰面积所代表的该化合物的量进行求和，作为各育种材料叶片内该化合物的相对含量；

4)作为育种亲本的育种材料筛选

可作为育种亲本的育种材料筛选具体地分为以下三个步骤：

第一步，各育种材料收获器官内目标化合物理论含量的测算

依相关系数由高到低筛选出与育种改良目标化合物相关的化合物，建立多元线性回归关系式，依多元线性回归关系式测算各育种材料叶片内育种改良目标化合物的理论含量；

第二步，作为父本的育种材料筛选

比较各育种材料叶片所含改良目标化合物实测值和依多元线性回归关系式运算所得测算值，根据育种方向确定作为父本的育种材料：若需通过育种提高甜叶菊叶片中目标化合物的含量，则以实测值高、测算值与实测值相近、抗病性等田间性状好的育种材料为父本；反之，若需降低甜叶菊叶片中目标化合物的含量，则以实测值低、测算值与实测值相近、抗病性等田间性状好的甜叶菊育种材料为父本；

第三步，作为母本的育种材料筛选

比较各育种材料叶片所含改良目标化合物的实测值与依多元线性回归关系式运算所得测算值，再根据育种方向确定可作为母本的育种材料：若需提高目标化合物的含量，则以测算值高、测算值大于实测值、产量高的育种材料为母本；反之，若需降低甜叶菊叶片中目标化合物的含量，则以测算值低、测算值小于实测值、产量高的甜叶菊育种材料为母本。