[发明专利]一种蓝光介导调节质粒及其构建方法和应用有效
| 申请号： | 202110571089.7 | 申请日： | 2021-05-25 |
| 公开（公告）号： | CN113186190B | 公开（公告）日： | 2022-05-03 |
| 发明（设计）人： | 张后今;闫云君;王志乾;龚梦瑶;韩娟;张婷 | 申请（专利权）人： | 华中科技大学 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/81;C12N15/65;C07K14/195 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 李博 |
| 地址： | 430074 湖北*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 蓝光介导 调节 质粒 及其 构建 方法 应用 | ||
1.一种蓝光介导调节质粒，其特征在于，所述质粒包括蓝光调节启动子PC120和转录翻译蓝光蛋白的融合基因PGAP-SV40-VP-EL；
所述融合基因PGAP-SV40-VP-EL的核酸序列如SEQ ID NO.4所示；
所述启动子的核酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.根据权利要求1所述的蓝光介导调节质粒，其特征在于，所述启动子可被蓝光蛋白SV40-VP-EL识别并结合。
3.根据权利要求2所述的蓝光介导调节质粒，其特征在于，所述蓝光蛋白SV40-VP-EL的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
4.根据权利要求2所述的蓝光介导调节质粒，其特征在于，所述蓝光蛋白SV40-VP-EL的核酸序列如SEQ ID NO.3所示。
5.一种如权利要求1～4任意一项所述的蓝光介导调节质粒的构建方法，其特征在于，所述构建步骤包括：
以pAO815质粒为骨架，将融合基因PGAP-SV40-VP-EL替换pAO815质粒AOX1promoter以及AOX1promoter和AOX1terminator之间的序列，得到质粒pGSVEA；再将包含启动子PC120的另一融合基因替换质粒pGSVEA的CGTTCGTTTGTGC序列即可。
6.根据权利要求5所述的构建方法，其特征在于，所述包含启动子PC120的融合基因还包括报道基因和/或目的基因。
7.根据权利要求5所述的构建方法，其特征在于，所述融合基因通过GibsonAssembly的方式定点组装到pAO815质粒上。
8.如权利要求1～4任意一项所述的蓝光介导调节质粒和/或权利要求5～7任意一项所述的蓝光介导调节质粒的构建方法在毕赤酵母诱导表达中的应用。
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