[发明专利]一种快速欧李组织培养的方法

说明书

本发明提供了一种快速欧李组织培养的方法，属于植物组织培养技术领域。本发明一种快速欧李组织培养的方法，包括以下步骤：将消毒的种子萌发，得到欧李幼苗切段，每个幼苗段至少保留一个腋芽；以幼苗段作为欧李外植体接种至不定芽诱导培养基上进行不定芽诱导培养，得到欧李不定芽；将所述欧李不定芽接种至生根培养基上进行生根培养，得到长有不定根的欧李苗；将所述长有不定根的欧李苗炼苗移栽，得到完整的欧李植株。本发明将种子萌发获得的幼苗进行切断得到的带有腋芽的幼苗段为外植体进行组织培养，能大大提高不定芽诱导率，进而提高欧李植株的株数，满足市场对欧李植株的需求。

技术领域

本发明属于植物组织培养技术领域，具体涉及一种快速欧李组织培养的方法。

背景技术

欧李又叫山梅子、小李仁、耨李儿等，主要分布在我国黑龙江、吉林、辽宁、内蒙古河北、山东、山西等地。据了解，欧李成分中含有多种对人体有益的营养物质，尤其是其中的钙元素含量要比其他的水果要高很多。实际上欧李也是一种具有利水渗湿的中药材。现有技术中对欧李进行驯化栽培，有利于丰富市场果品种类。

现有技术中为了实现欧李的人工栽培，采用多种繁育技术，例如种子种植以及嫩枝扦插育苗。就种子种植而言，欧李种子的采集难度较大，就嫩枝扦插育苗而言，存在生根率较弱，移栽成活率也较低，这无疑给人工栽培欧李带来挑战。

为了不断探索欧李的人工栽培方法，现有技术开展了欧李组织培养工作，并初获成功，例如赵广德报报道了欧李组织培养的方法，其中公开了以一年生枝条为外植体进行组织培养的方法。但该方法对欧李组织培养的繁殖效率不理想，不能满足市场对大量欧李植株的需求。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种快速欧李组织培养的方法，有利于获得大量欧李组织苗。

本发明提供了一种快速欧李组织培养的方法，包括以下步骤：

1)将消毒的种子萌发，得到欧李幼苗切段，每个幼苗段至少保留一个腋芽；

2)以步骤1)中所述幼苗段作为欧李外植体接种至不定芽诱导培养基上进行不定芽诱导培养，得到欧李不定芽；

3)将步骤2)中所述欧李不定芽接种至生根培养基上进行生根培养，得到长有不定根的欧李苗；

4)将步骤3)中所述带有不定根的欧李苗炼苗移栽，得到完整的欧李植株。

优选的，步骤2)中不定芽诱导培养基是以MS培养基为基础培养基，还包括6-BA0.5～1.5mg/L、NAA 0.05～0.2mg/L、蔗糖30g/L和琼脂7.0g/L。

优选的，所述不定芽诱导培养基还包括6-BA 0.5mg/L、NAA 0.05mg/L、蔗糖30g/L和琼脂7.0g/L。

优选的，步骤2)中所述不定芽诱导培养的温度为24～26℃；

所述不定芽诱导培养的湿度为40％～50％；

在所述不定芽诱导培养期间进行光照；所述光照的周期为光照16h/黑暗8h；光照强度为2000～3000Lx；

所述不定芽诱导培养的时间为28～32d。

优选的，步骤3)中在接种至生根培养基上进行生根培养前，将所述欧李不定芽进行继代培养；

所述继代培养用培养基是以MS培养基为基础培养基，还包括6-BA 0.3～0.7mg/L、NAA 0.05～0.1mg/L、蔗糖30g/L和琼脂7.0g/L。

优选的，所述继代培养的温度为24～26℃；

所述继代培养的环境湿度为40％～50％；

在所述继代培养期间进行光照；所述光照的周期为光照16h/黑暗8h；光照强度为2000～3000Lx；