[发明专利]一株高产壳聚糖酶的菌株SH-50及其应用

权利要求书

1. 一株高产壳聚糖酶的菌株，命名为水丛毛单胞菌（Comamonas aquatic）SH-50，其特征在于：于2021年01月21日保藏于位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），保藏编号为CGMCC No.21696。

2. 一种利用权利要求1所述的高产壳聚糖酶的菌株制备壳聚糖酶的方法，其特征在于：包括如下步骤：将水丛毛单胞菌（Comamonas aquatic）SH-50菌液接种到发酵培养基中，在25～35℃、180～240 r/min条件下培养，得到含壳聚糖酶的发酵液。

3.根据权利要求2所述的利用高产壳聚糖酶的菌株制备壳聚糖酶的方法，其特征在于：

所述的发酵培养基的组成为：壳聚糖6～10g/L、酵母粉1～2g/L、硫酸铵0.3～0.7g/L、磷酸氢二钾0.05～0.15g/L、磷酸二氢钾0.2～0.6g/L、氯化钠8～12 g/L、七水硫酸镁0.1g/L、余量为水，pH6~7；

所述的接种量为0.5～1.5%v/v；

所述的发酵培养基的体积与发酵容器体积按2～4 : 5计算；

当所述的培养为高密度发酵培养时，所述的培养的条件为：搅拌转速为160～300 r/min，空气流量0.6～1.0 L/min，溶氧10%～15%，室温；

当所述的培养为摇瓶发酵培养时，所述的培养的条件为：1%的接种量、温度为29℃、发酵初始pH6.5，转速200 r/min。

4.根据权利要求2所述的利用高产壳聚糖酶的菌株制备壳聚糖酶的方法，其特征在于：

所述的水丛毛单胞菌（Comamonas aquatic）SH-50菌液通过如下方法得到：将水丛毛单胞菌（Comamonas aquatic）SH-50菌株接种于活化培养基中，于24～35℃、pH 5.5～7.5条件下培养25～35 h，得到生长至对数生长期末期的水丛毛单胞菌（Comamonas aquatic）SH-50菌液；其中，所述的活化培养基组成为：壳聚糖8.0～10.0g/L、酵母粉1.5～2.0g/L、硫酸铵0.5～1.0g/L、磷酸氢二钾0.1～0.3g/L、磷酸二氢钾0.4～1.0g/L、氯化钠5.0～10.0g/L、七水硫酸镁0.1～1.0g/L、余量为水；

所述的利用高产壳聚糖酶的菌株制备壳聚糖酶的方法包括以下步骤：

将所述的含壳聚糖酶的发酵液在8000～12000 r/min下离心8～12 min，收集上清液，得到壳聚糖酶粗酶液；

将所述的壳聚糖酶粗酶液进行硫酸铵分级沉淀，然后透析得到纯化后的壳聚糖酶。

5. 一种壳聚糖酶，其特征在于：由权利要求1所述的高产壳聚糖酶的菌株水丛毛单胞菌（Comamonas aquatic）SH-50发酵得到。

6.权利要求1所述的高产壳聚糖酶的菌株或权利要求5所述的壳聚糖酶在制备低分子量壳寡糖中的应用。