[发明专利]用于检测溶血性曼氏杆菌的LAMP引物组及方法有效
申请号: | 202110562325.9 | 申请日: | 2021-05-21 |
公开(公告)号: | CN113249503B | 公开(公告)日: | 2022-06-28 |
发明(设计)人: | 郭爱珍;刘宁宁;胡长敏;易萍;陈颖钰;陈建国;陈曦 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/6844;C12Q1/04;C12N15/11 |
代理公司: | 武汉智嘉联合知识产权代理事务所(普通合伙) 42231 | 代理人: | 徐绍新 |
地址: | 430070 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 检测 溶血 性曼氏 杆菌 lamp 引物 方法 | ||
1.用于检测溶血性曼氏杆菌的LAMP引物组在制备溶血性曼氏杆菌检测试剂盒中的应用,其特征在于:该引物组能够特异性扩增溶血性曼氏杆菌的lktC基因,所述引物组包括2条内引物、2条外引物和1条环引物,各引物的核苷酸序列如SEQ ID No.1-5所示。
2.权利要求1中所述的LAMP引物组在溶血性曼氏杆菌非诊断目的检测中的应用。
3.一种溶血性曼氏杆菌非诊断目的检测方法,其特征在于包括以下步骤:
1)提取样品总DNA;
2)利用权利要求1中所述的LAMP引物组进行LAMP扩增;
3)对扩增产物进行检测,
步骤3)中,通过向扩增产物中加入SYBR Green Ⅰ染料并根据颜色变化进行结果判定,若待测样品和阳性对照均由无色变为荧光绿色,而阴性对照由无色变为橙色,则表明待测样品中含有溶血性曼氏杆菌;若待测样品和阴性对照由无色变为橙色,而阳性对照由无色变为荧光绿色,则表明待测样品中不含有溶血性曼氏杆菌。
4.如权利要求3所述的检测方法,其特征在于,所述LAMP扩增的反应体系如下:
5.如权利要求3所述的检测方法,其特征在于:所述LAMP扩增的反应温度为68.2℃。
6.如权利要求3所述的检测方法,其特征在于:所述阳性对照是溶血性曼氏杆菌lktC基因构建的重组质粒。
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