[发明专利]用于检测溶血性曼氏杆菌的LAMP引物组及方法有效

专利信息
申请号: 202110562325.9 申请日: 2021-05-21
公开(公告)号: CN113249503B 公开(公告)日: 2022-06-28
发明(设计)人: 郭爱珍;刘宁宁;胡长敏;易萍;陈颖钰;陈建国;陈曦 申请(专利权)人: 华中农业大学
主分类号: C12Q1/689 分类号: C12Q1/689;C12Q1/6844;C12Q1/04;C12N15/11
代理公司: 武汉智嘉联合知识产权代理事务所(普通合伙) 42231 代理人: 徐绍新
地址: 430070 湖*** 国省代码: 湖北;42
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摘要:
搜索关键词: 用于 检测 溶血 性曼氏 杆菌 lamp 引物 方法
【权利要求书】:

1.用于检测溶血性曼氏杆菌的LAMP引物组在制备溶血性曼氏杆菌检测试剂盒中的应用,其特征在于:该引物组能够特异性扩增溶血性曼氏杆菌的lktC基因,所述引物组包括2条内引物、2条外引物和1条环引物,各引物的核苷酸序列如SEQ ID No.1-5所示。

2.权利要求1中所述的LAMP引物组在溶血性曼氏杆菌非诊断目的检测中的应用。

3.一种溶血性曼氏杆菌非诊断目的检测方法,其特征在于包括以下步骤:

1)提取样品总DNA;

2)利用权利要求1中所述的LAMP引物组进行LAMP扩增;

3)对扩增产物进行检测,

步骤3)中,通过向扩增产物中加入SYBR Green Ⅰ染料并根据颜色变化进行结果判定,若待测样品和阳性对照均由无色变为荧光绿色,而阴性对照由无色变为橙色,则表明待测样品中含有溶血性曼氏杆菌;若待测样品和阴性对照由无色变为橙色,而阳性对照由无色变为荧光绿色,则表明待测样品中不含有溶血性曼氏杆菌。

4.如权利要求3所述的检测方法,其特征在于,所述LAMP扩增的反应体系如下:

5.如权利要求3所述的检测方法,其特征在于:所述LAMP扩增的反应温度为68.2℃。

6.如权利要求3所述的检测方法,其特征在于:所述阳性对照是溶血性曼氏杆菌lktC基因构建的重组质粒。

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