[发明专利]一种利用微波-亚临界水萃取制备雀嘴茶提取物的方法

说明书

本发明公开了一种利用微波‑亚临界水萃取制备雀嘴茶提取物的方法，将雀嘴茶粉碎过筛，置入消解罐，加入水作为萃取剂，将消解罐置于微波消解仪中，在控制压力和微波功率，使得水处于亚临界状态下进行萃取，获得提取液，经过滤、干燥后，即得雀嘴茶提取物。本申请利用微波‑亚临界水萃取技术来制备雀嘴茶提取物，方法简单，步骤少，容易操作，无溶剂参与，因此产物中无溶剂残留，是绿色环保的方法。实验证实，本申请所制备的雀嘴茶提取物，富含6′‑O‑咖啡酰熊果苷、β‑熊果苷和绿原酸等成分，具有更好的抑制酪氨酸酶活性，降低黑色素生成的功能，可用作化妆品中的美白成分，也可作为食品添加剂及杀虫剂中的有效成分。

技术领域

本发明属于生物和医药技术领域，更具体地说，涉及一种利用微波-亚临界水萃取制备雀嘴茶提取物的方法。

背景技术

从古至今，人们对于美白的追求就像人类对于光明的追求一样从未停止。据统计，全球大约有15％的人会购买美白产品，其中亚洲占主导地位。这些皮肤美白产品的作用机制主要是减少黑色素，而黑色素是决定皮肤颜色的主要来源，黑色素越多，皮肤颜色越深，反之则浅，因此，美白化妆品功效评价往往通过皮肤黑色素含量的减少程度来进行评判。目前，人工合成的美白剂很大一部分是自然界中原本不存在的，它们在实现某种功能的同时不可避免地存在着负面的效应，因此，从自然界中寻求天然来源的美白剂成为科研、市场和消费者关注的热点。

市面上大多数化妆品或美白剂都是采用酪氨酸酶抑制剂，如对苯二酚、曲酸及衍生物、熊果苷及其衍生物等已被用作美白剂。对苯二酚是一种活性较高的黑色素抑制剂，但性质很不稳定，易在空气中氧化变色，且有引起皮肤永久性白斑的报道，因此，对苯二酚已被国内外限制或禁止使用于美白化妆品中，仅在临床上用于治疗皮肤色素沉着性疾病。曲酸是真菌好氧发酵的一种产物，部分曲酸衍生品已在化妆品领域得到市场化，但是曲酸潜在的致癌性和贮存过程中的不稳定性限制了其在化妆品中的应用。熊果苷是天然活性物质，祛斑和美白效果好，且毒副作用极小，是目前国内外常用的有效的高端化妆品美白添加剂。熊果苷有α-熊果苷和β-熊果苷两种异构体，α-熊果苷在美白功效和安全性上远远优于β-熊果苷，但两者来源完全不同，β-熊果苷可通过植物提取、植物细胞培养和人工合成三种方法获得，由于天然资源匮乏、提取步骤复杂及提取产率低等局限，目前市场上的β-熊果苷基本都是由对苯二酚人工合成的，存在对苯二酚残留的风险；α-熊果苷一般通过不同的微生物转化法和酶合成法进行制备，产量少。脱氧熊果苷是基于熊果苷的活性，根据定量构效关系设计合成的高效酪氨酸抑制剂，其效果是一般熊果苷的350倍，但存在收率低、成本高、污染大、操作复杂、难以实现工业化生产等缺点。因此，迫切需要开发具有高活性、高稳定性、高安全性且易得的新型酪氨酸酶抑制剂。

6′-O-咖啡酰熊果苷是从雀嘴茶中发现的一种新型黑色素抑制化合物，研究表明6′-O-咖啡酰熊果苷的黑色素抑制活性优于β-熊果苷，毒性却低于β-熊果苷。雀嘴茶是一种传统的民间饮品，除了6′-O-咖啡酰熊果苷，其提取物中的绿原酸和β-熊果苷也是主要活性成分，也都具有黑色素抑制作用，因此，以雀嘴茶提取物直接作为黑色素抑制剂不仅可以降低生产成本，而且由于抗氧化活性成分之间的协同作用可起到增效作用。

目前雀嘴茶中活性成分的提取技术主要有水提和醇提，由于醇提存在溶剂残留等问题，水提是较为普遍采用的技术。然而与醇提物相比，水提法由于提取的有效成分较少，所得提取物活性较低。此外，无论是水提还是醇提，都具有流程长、耗时多等问题。

发明内容

针对现有技术存在的上述问题，本发明所要解决的技术问题在于提供一种利用微波-亚临界水萃取制备雀嘴茶提取物的方法，具有不采用溶剂、流程短等优势，所得雀嘴茶提取物对酪氨酸酶具有显著的单酚酶抑制和二酚酶抑制作用，且活性优于传统水提所得的雀嘴茶提取物。

为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案如下：