[发明专利]一种生物纳米碲及其利用恶臭假单胞菌的生物合成方法与应用

权利要求书

1.一种利用恶臭假单胞菌生物合成纳米碲的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

1)将恶臭假单胞菌接种于培养基中，并进行培养，得到菌浊液；

2)将菌浊液与亚碲酸盐混合并继续培养，所得发酵产物经分离纯化，即得到生物纳米碲。

2.根据权利要求1所述的一种利用恶臭假单胞菌生物合成纳米碲的方法，其特征在于，步骤1)包括以下步骤：

1-1)将恶臭假单胞菌的单菌落接种于种子培养基，并摇床培养12-48h，得到种子液；

1-2)将种子液以0.5-2.0vol％的接种量接种于生长培养基中，并摇床培养至菌液OD₆₀₀＝1.0-4.0，即得到菌浊液。

3.根据权利要求1所述的一种利用恶臭假单胞菌生物合成纳米碲的方法，其特征在于，步骤2)中，混合过程包括：将菌浊液以0.5-2.0vol％的接种量接种于含有亚碲酸盐的培养基中，并摇床培养至菌液OD₆₀₀＝1.0-4.0；或者，

将菌浊液与亚碲酸盐溶液混合。

4.根据权利要求1至3任一项所述的一种利用恶臭假单胞菌生物合成纳米碲的方法，其特征在于，所用培养基均包括LB培养基与M9培养基，所述的LB培养基包括5-15g/L NaCl，5-15g/L胰蛋白胨，2-8g/L酵母提取物；所述的M9培养基包括0.5-1.5g/L NH₄Cl，5-10g/LNa₂HPO₄，1-5g/L KH₂PO₄。

5.根据权利要求1所述的一种利用恶臭假单胞菌生物合成纳米碲的方法，其特征在于，步骤1)中，所述的摇床培养中，培养温度均为25-35℃，摇床转速均为200-250rpm；

步骤2)中，培养条件包括培养温度为30℃，摇床转速为220rpm，培养时间为12-48h。

6.根据权利要求1所述的一种利用恶臭假单胞菌生物合成纳米碲的方法，其特征在于，步骤2)中，在混合后得到的发酵培养基中，所述的亚碲酸盐的浓度为50-300mg/L。

7.根据权利要求1所述的一种利用恶臭假单胞菌生物合成纳米碲的方法，其特征在于，步骤2)中，所述的发酵产物的分离纯化过程包括：

2-1)将发酵产物于室温下离心分离，并去除上清液，之后加入生理盐水重悬沉淀，并超声破碎细胞；

2-2)离心取上清液，并萃取，之后再进行离心，去除上清液，并采用水重悬洗涤；

2-3)加入洗涤液并依次经过煮沸、离心后，去除上清液，之后采用乙醇重悬洗涤沉淀，干燥后即得到所述的生物纳米碲。

8.根据权利要求7所述的一种利用恶臭假单胞菌生物合成纳米碲的方法，其特征在于，步骤2-1)中，所述的离心分离中，离心转速为3000-4000rpm，离心时间为10-30min；所述的超声破碎细胞中，超声功率为150-300W，破碎时间为10-30min；

步骤2-2)中，第一次离心过程中，离心转速为3000-4500rpm，离心时间为10-30min；萃取过程中，萃取剂包括正辛醇，萃取剂用量为上清液体积的2-4倍，萃取温度为1-6℃，萃取时间为12-20h；第二次离心过程中，离心转速为12000-20000rpm，离心时间为10-30min；

步骤2-3)中，所述的洗涤液中，包括100-300mM Tris-HCl与2-6wt％十二烷基硫酸钠，pH为6-8，用量为80-150μL/40mg固体沉淀；煮沸过程中，煮沸时间为3-10min；离心过程中，离心转速为10000-15000rpm，离心时间为10-30min；干燥过程中，干燥温度为60℃。

9.一种生物纳米碲，其特征在于，其采用如权利要求1至8任一项所述的方法制备而成。

10.一种如权利要求9所述的生物纳米碲的应用，其特征在于，所述的生物纳米碲在生物传感器、抑菌试剂、抗肿瘤药物、肿瘤检测试剂或半导体材料中的应用。