[发明专利]一种高产羟基酪醇的酿酒酵母及其构建方法有效
| 申请号： | 202110546281.0 | 申请日： | 2021-05-19 |
| 公开（公告）号： | CN113249240B | 公开（公告）日： | 2023-04-28 |
| 发明（设计）人： | 罗云孜;刘化一 | 申请（专利权）人： | 天津大学 |
| 主分类号： | C12N1/19 | 分类号： | C12N1/19;C12N15/81;C12N15/53;C12P7/22;C12R1/865 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 刘猛 |
| 地址： | 300073 天津市*** | 国省代码： | 天津;12 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 高产 羟基 酿酒 酵母 及其 构建 方法 | ||
1.一种高产羟基酪醇的酿酒酵母，其特征在于，在能够合成酪醇的酿酒酵母CEN.PK2-1C基础上进一步表达如下任意组合的HpaB和HpaC：
（1）来源于铜绿假单胞菌的HpaB，以及来源于肠沙门氏菌、铜绿假单胞菌或大肠杆菌的HpaC；或
（2）来源于大肠杆菌的HpaB和来源于铜绿假单胞菌的HpaC；
所述能够合成酪醇的酿酒酵母经由如下方式改造获得：
（1）过表达酿酒酵母ARO2、ARO10、TKL1以及RKI1，过表达酿酒酵母 ARO4K229L和ARO7G141S突变体，以及敲除酿酒酵母 PHA2和PDC1的表达。
2.根据权利要求1所述高产羟基酪醇的酿酒酵母，其特征在于，所述来源于铜绿假单胞菌的HpaB为Q212D突变的突变型；HpaC来源于大肠杆菌。
3.根据权利要求1所述高产羟基酪醇的酿酒酵母，其特征在于，所述能够合成酪醇的酿酒酵母经由如下任意一种方式改造获得：
（2）过表达酿酒酵母ARO2、ARO10、TKL1以及RKI1，过表达酿酒酵母 ARO4K229L、ARO7G141S和ARO3D154N突变体，以及敲除酿酒酵母 PHA2和PDC1的表达；
（3）过表达酿酒酵母ARO2、ARO10、TKL1以及RKI1，过表达酿酒酵母 ARO4K229L、ARO7G141S和ARO3D154N突变体，过表达来源于大肠杆菌的TyrAM53I A354V双突变体，以及敲除酿酒酵母 PHA2和PDC1的表达。
4.根据权利要求1-3任意一项所述高产羟基酪醇的酿酒酵母，其特征在于，还包括：所述能够合成酪醇的酿酒酵母内源的
5.权利要求1所述高产羟基酪醇的酿酒酵母的构建方法，其特征在于，将表达如下任意组合的HpaB和HpaC的重组载体转入能够合成酪醇的酿酒酵母CEN.PK2-1C中，获得所述高产羟基酪醇的酿酒酵母；
或将如下任意组合的HpaB和HpaC的编码基因整合到能够合成酪醇的酿酒酵母CEN.PK2-1C基因组中进行表达，获得所述高产羟基酪醇的酿酒酵母；
（1）来源于铜绿假单胞菌的HpaB，以及来源于肠沙门氏菌、铜绿假单胞菌或大肠杆菌的HpaC；
或
（2）来源于大肠杆菌的HpaB和来源于铜绿假单胞菌的HpaC；
所述能够合成酪醇的酿酒酵母经由如下方式改造获得：
（1）过表达酿酒酵母ARO2、ARO10、TKL1以及RKI1，过表达酿酒酵母 ARO4K229L和ARO7G141S突变体，以及敲除酿酒酵母 PHA2和PDC1的表达。
6.根据权利要求5所述构建方法，其特征在于，所述能够合成酪醇的酿酒酵母经由如下任意一种方式改造获得：
（2）过表达酿酒酵母ARO2、ARO10、TKL1以及RKI1，过表达酿酒酵母 ARO4K229L、ARO7G141S和ARO3D154N突变体，以及敲除酿酒酵母 PHA2和PDC1的表达；
（3）过表达酿酒酵母ARO2、ARO10、TKL1以及RKI1，过表达酿酒酵母 ARO4K229L、ARO7G141S和ARO3D154N突变体，过表达来源于大肠杆菌的TyrAM53I A354V双突变体，以及敲除酿酒酵母 PHA2和PDC1的表达。
7.根据权利要求5或6所述构建方法，其特征在于，还包括：将能够合成酪醇的酿酒酵母内源的
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于天津大学，未经天津大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202110546281.0/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
