[发明专利]一种利用HPLC指纹图谱鉴别决明子提取物的方法在审
| 申请号： | 202110544555.2 | 申请日： | 2021-05-19 |
| 公开（公告）号： | CN113281432A | 公开（公告）日： | 2021-08-20 |
| 发明（设计）人： | 张继斌;王玉;刘晶晶;陈志元 | 申请（专利权）人： | 劲牌持正堂药业有限公司 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/36 |
| 代理公司： | 北京文苑专利代理有限公司 11516 | 代理人： | 胡颉 |
| 地址： | 435000 湖北省黄*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 利用 hplc 指纹 图谱 鉴别 决明子 提取物 方法 | ||
1.一种利用HPLC指纹图谱鉴别决明子提取物的方法，其特征在于：包括以下测定条件及步骤：
参照物溶液的制备：精密称取橙黄决明素对照品，使用甲醇溶解制成参照物溶液；
决明子提取物溶液的制备：精密称取多个不同批次决明子提取物，使用75％浓度乙醇溶解制成决明子提取物溶液；
色谱分析条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1％乙酸为流动相按规定进行梯度洗脱；检测波长为284nm；
指纹图谱的建立：精密吸取参照物溶液10μL注入液相色谱仪，测定，记录60分钟的色谱图，即得参照物色谱图；精密吸取多个不同批次决明子提取物溶液各10μL，分别注入液相色谱仪进行测定，记录60分钟的色谱图，得到多个决明子提取物色谱图；各决明子提取物色谱图中应呈现10个与参照物色谱图相对应的色谱峰，其中9号峰(橙黄决明素)与参照物峰保留时间相对应，得出决明子提取物液相色谱的共有模式，作为决明子提取物标准指纹图谱；
指纹图谱的应用：将待测试的决明子提取物色谱图与决明子提取物标准指纹图谱进行比对，计算两者的相似度，根据相似度数值即可确定决明子提取物质量。
2.据权利要求1所述一种利用HPLC指纹图谱鉴别决明子提取物的方法，其特征在于：所述参照物溶液的制备步骤中，参照物溶液浓度为30μg/ml。
3.根据权利要求1所述一种利用HPLC指纹图谱鉴别决明子提取物的方法，其特征在于：所述决明子提取物溶液的制备步骤中，决明子提取物溶液浓度为3mg/ml。
4.根据权利要求3所述一种利用HPLC指纹图谱鉴别决明子提取物的方法，其特征在于：所述决明子提取物溶液的配制步骤为：精密称取决明子提取物决明子提取物30mg于10mL容量瓶中，加入75％乙醇约8mL，超声(250W，53KHz)溶解10分钟后，放置冷却至室温，用75％乙醇溶解定容至刻度，摇匀，过滤，即得浓度为3mg/ml的决明子提取物溶液。
5.种利用HPLC指纹图谱鉴别决明子提取物的方法的制备方法，其特征在于：所述色谱分析条件中，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1％乙酸为流动相，洗脱梯度如下：
时间/min 乙腈 0.1％乙酸 0 15 85 3 20 80 35 30 70 50 65 35 50.1 15 85 60 15 85
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