[发明专利]一种萘环类酪氨酸酶荧光探针

说明书

本发明公开了一种萘环类酪氨酸酶荧光探针，具体化学结构式如下所示：本发明的荧光探针可用快速定量检测雪梨中酪氨酸酶酶活度。

技术领域

本发明涉及一种萘环类酪氨酸酶荧光探针以及其在检测酪氨酸酶中的应用。

背景技术

酪氨酸酶(tyrosinase，Tyr)，也称为多酚氧化酶，广泛存在于动植物、微生物以及人体中。它是一种含铜的氧化还原酶，能够催化单酚和双酚氧化生成苯醌。在生物体内可催化氧化酪氨酸或多巴胺合成黑色素，并与其他关键酶结合产生色斑。植物中的Tyr主要参与酚类代谢、果蔬褐变、植物抗病性，还可诱导植物发生抗营养防御反馈，降低草食动物获取营养。此外，它还能抑制细菌并防止其传播。

目前，在红茶、葡萄干和大枣干燥、啤酒生产等过程中，适当添加酪氨酸酶，可以增加产品的色调。目前，常用来检测Tyr的方法包括，电泳法，比色法，电化学法和辐射测量法。

有机荧光探针因其高选择性、高稳定性和低成本而备受关注，开发一种荧光探针，用于测定食品中酪氨酸酶的含量，具有重要的研究意义。

发明内容

本发明目的是提供一种萘环类酪氨酸酶荧光探针，它适于食品中酪氨酸酶的检测。

更具体的是，本发明涉及一种萘环类酪氨酸酶荧光探针，它通过下式表示：

附图说明

图1是在二甲基亚砜/pH 7.4缓冲溶液(v/v＝3∶1)中，随着不同酶活度酪氨酸酶的加入，本发明的荧光探针(10μM)的荧光强度变化。嵌入图：酪氨酸酶的酶活度。

图2是在二甲基亚砜/pH 7.4缓冲溶液(v/v＝3∶1)中，本发明的荧光探针(10μM)荧光强度随着酪氨酸酶的酶活度变化的标准曲线。

图3在365nm紫外灯下，本发明的荧光探针溶液加入不同酶活度酪氨酸酶(0，100，200，400，600，800，1000U/mL)后溶液颜色变化情况。

具体实施方式

实施例1.一种萘环类酪氨酸酶荧光探针的制备

合成路线如下式所示：

于100mL三口烧瓶中，将化合物1(0.35g，1.20mmol)和K₂CO₃(0.50g，3.60mmol)溶解于N，N-二甲基甲酰胺(40mL)，将间羟基苄基溴(化合物2，0.45g，2.，0mmol)溶解于N，N-二甲基甲酰胺(10mL)中，逐滴滴加到反应体系中，60℃冷凝回流6h，加适量水，0.12M HCl调节pH至5-6，乙酸乙酯萃取，无水Na₂SO₄干燥，旋蒸，二氯甲烷重结晶，抽滤，干燥，得0.12g白色固体目标产物，收率26.08％。

产物经过核磁氢谱、核磁碳谱、高分辨质谱表征。