[发明专利]一种能够使细胞图案化生长的表面及其应用

权利要求书

1.一种能够使细胞图案化生长的表面，其特征在于，制备步骤为：

1)用硅烷偶联剂制备氨基修饰的玻璃表面；

2)按照a或b的任一步骤进行：

a、用带有预设图案的聚二甲基硅氧烷印章，以氧等离子体刻蚀的方式，在步骤1)得到的玻璃片表面形成氨基预设图案，得到氨基图案化玻璃片；再用羧基被活化的天然多糖与氨基图案化玻片发生酰胺化反应，在玻璃片表面形成多糖预设图案；

b、步骤1)得到的玻璃片和羧基被活化的天然多糖进行酰胺化反应；再用带有预设图案的聚二甲基硅氧烷印章，以氧等离子体刻蚀的方式，在玻璃片表面形成多糖预设图案；

所述的天然多糖需配成溶液，浓度为1～5mg/mL，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺与N-羟基琥珀酰亚胺的浓度分别为20～100mM和50～200mM，4-(4,6-二甲氧基三嗪-2-基)-4-甲基吗啉的用量为天然多糖的羧基的物质的量的2～4倍。

2.根据权利要求1所述的一种能够使细胞图案化生长的表面，其特征在于，步骤2)中所述的天然多糖的羧基用1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺与N-羟基琥珀酰亚胺的混合物或4-(4,6-二甲氧基三嗪-2-基)-4-甲基吗啉激活。

3.根据权利要求1所述的一种能够使细胞图案化生长的表面，其特征在于，所述的天然多糖为透明质酸、海藻酸钠、肝素、葡聚糖、壳聚糖或普鲁兰。

4.根据权利要求2所述的一种能够使细胞图案化生长的表面，其特征在于，所述的天然多糖的溶液的pH为5.0～7.0。

5.根据权利要求1所述的一种能够使细胞图案化生长的表面，其特征在于，步骤1)的具体步骤为：将洁净的玻璃片用氧等离子体进行处理，以富集表面羟基，然后将其浸泡在体积分数为5％～10％的硅烷偶联剂溶液中，密封反应6～12h，反应温度为60～80℃，反应结束后，先用乙醇和去离子水清洗，N₂吹干，在60～80℃下烘箱固化4～8h。

6.根据权利要求5所述的一种能够使细胞图案化生长的表面，其特征在于，所述的处理的时间为2～5min，功率为80～100W，所述的硅烷偶联剂的溶剂为90％wt的乙醇溶液。

7.根据权利要求1所述的一种能够使细胞图案化生长的表面，其特征在于，步骤2)所述的带有预设图案的聚二甲基硅氧烷印章的制备方法为：将液态的聚二甲基硅氧烷预聚体和固化剂混合倒入预设图案模板中固化，得到带有预设图案的聚二甲基硅氧烷印章；所述的固化剂为道康宁Sylguard-184硅弹性体固化剂。

8.根据权利要求1所述的一种能够使细胞图案化生长的表面，其特征在于，步骤2)所述的氧等离子体刻蚀的步骤为：将步骤1)得到的带有预设图案的聚二甲基硅氧烷印章置于需刻蚀玻璃片表面，稍用力压使印章图案面的凸起部分中的与玻璃片表面完全贴合，然后放入氧等离子体机处理，氧等离子体处理功率为80～100W，处理次数为2～5次，每次处理时间为7～10min。

9.权利要求1-8任一所述的一种能够使细胞图案化生长的表面的应用，其特征在于，将细胞接种在所述表面上，细胞能够在表面上进行图案化生长。