[发明专利]一种能促进腺病毒生长的培养基添加物

说明书

本发明公开了一种能促进腺病毒生长培养基添加物，属于细胞培养技术领域。包括：氯化钠，莫能菌素，磷酸氢二钠，葡萄糖,谷氨酰胺，盐酸腐胺，柠檬酸铁，乙二醇，磷脂，胆固醇，核糖核酸，白蛋白。将促病毒生长添加物加入到腺病毒培养基，可使腺病毒产量增加，为腺病毒生长提供基础。

技术领域

本发明属于细胞培养技术领域，具体涉及一种能促进腺病毒生长的培养基添加物。

背景技术

随着分子生物学的迅速发展，在实验室构建各种载体、克隆及分析目标基因，使疾病深入至分子水平研究成为可能，基因诊断及基因治疗技术也随之诞生。

目前基因治疗研究的热门方法是将外源基因DNA或RNA片段导入靶细胞或组织，研究靶基因的上调或抑制情况，从而而选择合适高效的基因导入介质系统尤为关键，而病毒载体也随之成为了当前基因治疗载体研究的热点，其优势在于：

1、病毒包装技术经历了多年的研究，已趋于成熟，可用于产业化大量生产；

2、病毒基因组的结构简单、分子背景比较清楚，稳定易于改造、易于制备；

3、病毒的宿主范围广，且具有高效的靶向特异性；

4、在目的基因表达方面相对于脂质体介导的效果更明显、长时、稳定；

5、通过载体改造的方式形成了复制缺陷型结构，安全性高；

6、可提高RNA干扰和基因过表达效率，增加实验成功率。

病毒介导是借助于病毒颗粒作为基因的载体，利用病毒的侵染特性，自发的侵染哺乳动物细胞，将目的基因导入哺乳动物细胞中，以完成目的产物的超量表达或干涉。该技术目前在基因、小RNA、转录因子等功能验证领域以及重组蛋白表达、转基因哺乳动物制备等领域作为一种主要的技术手段被广泛使用。该技术体系主要由病毒包装和病毒侵染筛选两个部分组成。病毒包装就是借助基因工程的方法将目的基因片段与人为改造病毒的基因组通过特殊的位点连接起来形成重组病毒基因组以及重组病毒制备的过程，常规使用的病毒包装系统有慢病毒包装系统和腺病毒包装系统。包装好的慢病毒和腺病毒都可以自主的侵染哺乳动物细胞，导入外源基因。

用于病毒包装的载体主要有腺病毒载体和慢病毒载体。

腺病毒感染效率高，很多细胞都能达到近99％，纯化后的腺病毒可以直接进行动物活体注射，可以在体外扩增，每次使用完后，可以自己用包装细胞进行扩增，节约成本。

但也存在较多问题，腺病毒包装周期比慢病毒较长(一般要两个半月到三个月)，产量低，病毒增殖不稳定，商业化配方保密，不明确等因素，导致腺病毒培养不稳定。

因此，如何提供一种能促进腺病毒生长的培养基添加物是本领域亟待解决的问题。

发明内容

本发明公开了一种能促进腺病毒生长的培养基添加物。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种能促进腺病毒生长培养基添加物，包括：氯化钠、莫能菌素、磷酸氢二钠、葡萄糖、谷氨酰胺、盐酸腐胺、柠檬酸铁、乙二醇、磷脂、胆固醇、核糖核酸和白蛋白；

一种能促进腺病毒生长培养基添加物，包括：氯化钠1-5g/L、莫能菌素50-90mg/L、磷酸氢二钠100-200mg/L、葡萄糖1-5g/L、谷氨酰胺0.1-0.5g/L、盐酸腐胺1-5mg/L、柠檬酸铁100-400mg/L、乙二醇1％-5％体积比、磷脂1-20mg/L、胆固醇1-25mg/L、核糖核酸1-50μg/L和白蛋白1-5g/L；