[发明专利]一种ELISA试剂盒包被板用稳定剂及其制备方法、试剂盒包被板、试剂盒

说明书

本申请涉及生物检测技术领域，具体公开了一种ELISA试剂盒包被板用稳定剂及其制备方法、试剂盒包被板、试剂盒。ELISA试剂盒包被板用稳定剂包括水和如下质量百分比的组分：丙三醇5%‑15%，海藻糖0.5%‑1.5%，谷氨酸钠0.005%‑0.015%，硫氧还蛋白0.002%‑0.008%；其制备方法为：S1:将丙三醇、海藻糖、谷氨酸钠、水混合均匀，调节pH为7后制得混合液；S2:将硫氧还蛋白加入步骤S1中的混合液内混合均匀后即得。本申请的ELISA试剂盒包被板用稳定剂可用于ELISA试剂盒包被板的制备，其制作的ELISA试剂盒具有稳定性好、保存期长的优点。

技术领域

本申请涉及生物检测技术领域，更具体地说，它涉及一种ELISA试剂盒包被板用稳定剂及其制备方法、试剂盒包被板、试剂盒。

背景技术

酶联免疫吸附测定技术(ELISA)自20世纪70年代初问世以来，发展非常迅速，目前被广泛应用于免疫学、医学、生物学等诸多领域。ELISA是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。

ELISA试剂盒通常可以分为即用型和非即用型，常规即用型ELISA试剂盒的抗原包被板在制备过程中，一般经过包被、洗涤、封闭、洗涤、干燥五个步骤，但由于用于包被的抗原或抗体都为蛋白质，蛋白质具有生物活性，易受温度及一些有机或无机物影响，出现失活、变性的情况，因此经上述步骤制备的ELISA试剂盒的保存期及数据测试的稳定性不理想。

发明内容

为了提高ELISA试剂盒的保存期和数据测试的稳定性，使ELISA试剂盒能够长期储存使用，本申请提供一种ELISA试剂盒包被板用稳定剂及其制备方法、试剂盒包被板、试剂盒。

第一方面，本申请提供一种ELISA试剂盒包被板用稳定剂，采用如下的技术方案：一种ELISA试剂盒包被板用稳定剂，包括水和如下质量百分比的组分：丙三醇5％-15％，海藻糖0.5％-1.5％，谷氨酸钠0.005％-0.015％，硫氧还蛋白0.002％-0.008％。

通过采用上述技术方案，由于采用丙三醇，丙三醇含有大量的羟基，其自身比较稳定，丙三醇能在吸附在包被板上并在抗原表面上形成一层保护膜，保护抗原的蛋白结构，另外在后续的检测步骤中还可以加速抗原抗体的沉积速度，增加酶标抗体与抗原的结合几率。另外，海藻糖能够与抗原的蛋白分子的结合水相互作用，表现出很好的保护功效。并且，谷氨酸钠能够提高抗原蛋白分子的持水力，提高其保水性，进一步维持抗原的生物活性。而硫氧还蛋白具有很好的热稳定性，且分子量较低，分散性能好，其能够分散嵌设在丙三醇保护膜和抗原蛋白分子之间，硫氧还蛋白通过半胖氨酸硫醇-二硫键交互促进其他蛋白还原，从而起到很好的抗氧化作用，硫氧还蛋白作为氢受体参与到氧化还原反应中，大大降低抗原被氧化破坏受损的几率，硫氧还蛋白与海藻糖、丙三醇复配协同，对抗体或抗原起到很好的保护效果，大大延长了所制得的ELISA试剂盒的保存周期以及提高了ELISA试剂盒测试数据的稳定性。

优选的，一种ELISA试剂盒包被板用稳定剂，包括水和如下质量百分比的组分：丙三醇8％-12％，海藻糖0.7％-1.3％，谷氨酸钠0.008％-0.012％，硫氧还蛋白0.003％-0.007％。

通过采用上述技术方案，按照上述比例复配的ELISA的稳定剂具有更佳的稳定效果，保持抗原的免疫活性，降低不同存放周期的ELISA试剂盒之间检测结果的CV值，测试结果更加准确有效。

优选的，所述硫氧还蛋白为重组细菌硫氧还蛋白。

通过采用上述技术方案，重组细菌硫氧还蛋白对活性氧类物质具有更佳的清除作用，对超氧化阴离子、过氧化氢、游离羟基等有害物质交互作用，抑制其反应机理和活性，维持蛋白的氧化还原平衡环境。

优选的，所述硫氧还蛋白与丙三醇的质量比为1:(1000-3000)。