[发明专利]一种检测血栓或凝血相关疾病的生物标志物及其应用

说明书

本发明涉及血栓或凝血相关疾病检测技术领域，尤其涉及一种生物标志物及其在血栓或凝血相关疾病检测工作方面的应用。标志物包括凝血因子13激活肽(FXIIIAP)或/和凝血因子13的A亚基(FXIIIA)。本发明提供的检测试剂盒包括捕获抗体和检测抗体，为以FXIIIAP为抗原制得的特异性抗体。本发明的生物标志物在对包含脑卒中在内的血栓或凝血相关疾病进行快速筛查诊断方面有很好的应用前景，可大大提高现有诊断的灵敏度和特异性，推测血栓形成时间及程度，并可对疾病的严重程度及预后进行预测。

技术领域

本发明涉及血栓或凝血相关疾病检测技术领域，尤其涉及一种检测血栓或凝血相关疾病的生物标志物及其应用。

背景技术

血栓形成及其相关凝血性疾病一直是临床诊断中重要诊断项目，涉及广泛的疾病，包括脑静脉血栓(CVT)，肾静脉血栓(RVT)，静脉血栓(VTE)，心肌梗塞(MI)等等。其中脑静脉血栓、心肌梗塞的早期诊断与早期治疗尤为重要。以脑静脉血栓(缺血性中风的一个重要原因)为例，现有的诊断方法主要包括计算机断层扫描(CT)和磁共振成像(MRI)，在判断中风的发生、类型和严重性方面非常有效。然而，这些技术首先较为昂贵并且耗时，其次对早期发现的筛查作用不明显，容易错过最佳治疗时机。此外对于出血性脑卒中的诊断，CAT扫描(计算机化轴位断层扫描)有较好的效果。尽管CAT扫描对出血性中风的鉴别相对灵敏，但它在中风评估中对脑缺血不十分灵敏，通常在中风发作后24到36小时的时候才呈阳性，并且大约50％的缺血性脑卒中难以在CAT扫描看到。其结果往往是，当现有的诊断技术确诊中风时，早期治疗的机会已经丧失。

对于急性缺血性及出血性脑卒中的诊断，目前这些临床常用的方法在灵敏度，准确度和时效性上存在不足，容易产生误诊或漏诊，从而延误治疗时机。

近年来研究人员发现，利用分子标志物快速筛选诊断并区分脑卒中的类型，是可供解决这些问题的新思路。

生物标志物(biomarker)是指可以标记生物体器官，组织或细胞结构或功能改变的生化指标，因此生物标志物的检测可用于疾病诊断、并为后续治疗方案提供科学依据。

中风的多种标志物是已知的。在公开号为CN103299191A的发明专利中公开了中风相关的分子标志物。在公开号为CN1339108A的发明专利中公开了诊断和区分中风的方法。

血栓形成可以作为诊断例如缺血性脑卒中等心血管疾病的一个重要指标。目前临床使用的对血栓的生物标志物筛选检查是D二聚体检测，主要应用在静脉血栓栓塞(VTE)、深静脉血栓形成(DVT)和肺栓塞(PE)的诊断。在很多情况下，D二聚体的检查已显示出良好的发展前景。但由于多种因素都可以影响D二聚体的检测，以及D二聚体本身的缺陷，因此在临床上使用D二聚体检测仍存在很多争议。首先D二聚体来源于纤溶酶溶解的交联纤维蛋白凝块，主要反映纤维蛋白溶解(血栓溶解)的状况，而并非直接反映血栓形成。所有影响血栓溶解的因素均可影响D二聚体检测结果。例如具有溶栓障碍的患者，口服抗凝药的患者，VTE症状持续14天以上的患者均可能为假阴性。另外，D二聚体反映血栓溶解过程且其半衰期较长(13-23小时)当患者有其他可引起凝血的诱因时，例如炎症或怀孕时，也可以预期出现假阳性结果。同时D二聚体在临床测试中也有很高的漏诊率。例如，对于CVT，D二聚体存在20％的漏诊，早期(症状出现小于24小时)漏诊率更高(大约50％)。对于静脉血栓一般的D二聚体诊断也存在50％的漏诊。特别是对早期新生成的血栓D二聚体容易出现假阴性结果。

由于D二聚体半衰期长，不能在已有凝血疾病时，准确及时反映机体是否正在发生出血及凝血。另外，由于D二聚体分析物的定义不明确，不同的测定方法基于识别不同纤维蛋白片段或表面结构的不同单克隆抗体。没有可以用作国际标准的参考制剂或校准剂。加上其敏感度和特异性不高的缺点，D二聚体的应用仍存在争议。此外检测结果缺乏治疗指导意义，并不能及时准确的反映体内凝血状况，无法指示治疗策略，例如抗凝的效果如何，也难以确认是否出现新血栓，因为陈旧血栓依旧可以被溶解而产生D二聚体。

发明内容

(一)要解决的技术问题