[发明专利]一种用于全集成微流控芯片的STR快速个体识别扩增试剂及其应用

说明书

本发明公开了一种用于全集成微流控芯片的STR快速个体识别扩增试剂及其应用。本发明基于国内首台自主研发的全集成式DNA现场快速检验仪器Quick TargSeq构建了一套包含20个CODIS STR基因座和1个Amelogenin性别基因座的微流控芯片快速扩增试剂—RTyper 21，并采用冻干方式构建了RTyper21芯片冻干扩增试剂。通过实验证明：该RTyper21芯片冻干扩增试剂可以在微流控芯片卡盒中长期储存，可对口腔拭子、血卡、唾液卡样本进行检测，并在2个小时内完成样本裂解、PCR扩增、电泳分离全部流程，满足了公安实战现场、快速检测的迫切需要。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种用于全集成微流控芯片的STR快速个体识别扩增试剂及其应用。

背景技术

利用PCR-STR分型技术能够对犯罪现场生物物证进行个体识别，从而认定或者排除嫌疑人。常规STR分型过程包括DNA提取、PCR扩增、电泳分离和分型图谱分析。整个检测过程大致需要6～8小时，耗时长、步骤多、操作复杂，对操作人员专业技能要求较高，也容易出现样本污染风险。目前一些重大、突发性案件常常需要短时间获得检验结果，以为案件侦查提供方向。常规DNA分型检验方法已无法满足公安实战需求，亟需向着现场快速、集成便捷的方向实现革新。

微流控芯片技术是把生物、化学、医学分析过程的样品制备、反应、分离、检测等基本操作单元集成到一块微米尺度的芯片上，自动完成分析全过程。与传统分析方法相比，具有体积小、样品和试剂消耗少、易于实现操作流程自动化和全集成等诸多优势。目前，许多学者基于微流控芯片技术，对快速DNA检验开展了诸多研究，例如微流控芯片PCR技术、微流控芯片电泳技术、集成式芯片技术等。在此基础上，一系列DNA快速检验仪器也相继研发生产并得到应用，与仪器配套使用的STR快速检测试剂也是实现一体化快速检测不可或缺的一部分。目前国外的几款快检仪主要有：200，配套使用16HS试剂盒，90min内可完成包含16个基因座的整个DNA检验流程；单通道的ID，配套使用Express试剂盒，90min内可完成24个基因座的分型；以及ANDE^TM6C，使用FlexPlex^TM27试剂盒，该试剂盒包含20个CODIS核心位点，90min内完成DNA检验的所有步骤。

发明内容

本发明的一个目的是提供用于检测人基因组中21个基因座的引物对组；所述21个基因座分别为：D2S441、D5S818、D21S11、D16S539、D1S1656、TPOX、AMEL、D3S1358、D13S317、D7S820、D2S1338、D18S51、D19S433、D22S1045、D8S1179、vWA、TH01、D10S1248、D12S391、CSF1PO和FGA。

上述引物对组由如下(1)-(21)组成：

(1)用于检测D2S441的引物对1，由序列表中序列1和序列2所示的两条单链DNA组成；

(2)用于检测D5S818的引物对2，由序列表中序列3和序列4所示的两条单链DNA组成；

(3)用于检测D21S11的引物对3，由序列表中序列5和序列6所示的两条单链DNA组成；

(4)用于检测D16S539的引物对4，由序列表中序列7和序列8所示的两条单链DNA组成；

(5)用于检测D1S1656的引物对5，由序列表中序列9和序列10所示的两条单链DNA组成；

(6)用于检测TPOX的引物对6，由序列表中序列11和序列12所示的两条单链DNA组成；

(7)用于检测AMEL的引物对7，由序列表中序列13和序列14所示的两条单链DNA组成；

(8)用于检测D3S1358的引物对8，由序列表中序列15和序列16所示的两条单链DNA组成；