[发明专利]一种利用CRISPR/Cas9技术高效创制香味玉米的方法有效

专利信息
申请号: 202110510545.7 申请日: 2021-05-11
公开(公告)号: CN113215156B 公开(公告)日: 2022-07-22
发明(设计)人: 赵久然;杨进孝;张翔;史亚兴;卢柏山;武莹;刘亚;王元东 申请(专利权)人: 北京市农林科学院
主分类号: C12N15/113 分类号: C12N15/113;C12N9/22;C12N15/82;C12N15/29;A01H5/10;A01H6/46
代理公司: 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 代理人: 关畅
地址: 100097 北京市海淀区曙*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 利用 crispr cas9 技术 高效 创制 香味 玉米 方法
【权利要求书】:

1.重组载体在如下M1)-M8)任一种中的应用:

M1)创制ZmBADH2-1ZmBADH2-2双基因敲除的玉米京724突变体;

M2)制备创制ZmBADH2-1ZmBADH2-2双基因敲除的玉米京724突变体的产品;

M3)培育香味玉米;

M4)制备培育香味玉米的产品;

M5)提高玉米京724籽粒中2-AP含量;

M6)制备提高玉米京724籽粒中2-AP含量的产品;

M7)提高玉米京724籽粒香味;

M8)制备提高玉米京724籽粒香味的产品;

所述重组载体的核苷酸序列为序列6;其中,序列6的第101-495位为ZmU6启动子序列,第502-578位为tRNA序列,第579-598位为靶点序列,第599-684位为esgRNA骨架序列,第685-975位为OsU3终止子序列,第982-2695位为OsUbq3启动子序列,第2912-7012位为SpCas9编码基因序列,第7169-7423位为Nos终止子序列,第7452-9423位为ZmUbi启动子序列,第9430-10608位为PMI筛选剂抗性基因序列,第10615-10868位为Nos终止子序列;

所述ZmBADH2-1基因为序列1所示的基因组DNA分子;

所述ZmBADH2-2基因为序列3所示的基因组DNA分子;

所述香味玉米为不同香味梯度的玉米。

2.一种创制ZmBADH2-1ZmBADH2-2双基因敲除的玉米突变体的方法,包括如下步骤:将权利要求1中所述的重组载体导入受体玉米京724中,获得ZmBADH2-1ZmBADH2-2双基因敲除的玉米突变体。

3.一种培育香味玉米的方法,包括如下步骤:将权利要求1中所述的重组载体导入受体玉米京724中,获得香味玉米;所述香味玉米为不同香味梯度的玉米。

4.一种提高玉米籽粒中2-AP含量的方法,包括如下步骤:将权利要求1中所述的重组载体导入受体玉米京724中,实现提高玉米籽粒中2-AP含量。

5.一种提高玉米籽粒香味的方法,包括如下步骤:将权利要求1中所述重组载体导入受体玉米京724,实现提高玉米籽粒香味。

6.一种玉米育种的方法,包括如下步骤:按照权利要求2所述的方法获得ZmBADH2-1ZmBADH2-2双基因敲除的玉米突变体,以所述玉米突变体作为亲本材料进行育种。

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