[发明专利]一种双向迷你启动子及其使用方法在审
| 申请号： | 202110507296.6 | 申请日： | 2021-05-10 |
| 公开（公告）号： | CN113106099A | 公开（公告）日： | 2021-07-13 |
| 发明（设计）人： | 李善刚;邓莉;陈丽娇;陈永昌;王正波;张婷;张岩松;孙文杰;白饶仙;杨丽芸;马跃;卓艳 | 申请（专利权）人： | 昆明理工大学 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/864;C12N15/55 |
| 代理公司： | 昆明合盛知识产权代理事务所(普通合伙) 53210 | 代理人： | 牛林涛 |
| 地址： | 650000 云*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 双向 迷你 启动子 及其 使用方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种双向迷你启动子，其特征在于，所述启动子为双向启动，所述启动子正向下方酶切连接Cas9、GFP或TETR蛋白表达框进行转录表达，反向下方酶切连接sgRNA或shRNA蛋白表达框进行转录表达。
2.根据权利要求1所述的一种双向迷你启动子，其特征在于，所述启动子序列小于200bp。
3.根据权利要求1所述的一种双向迷你启动子，其特征在于，所述启动子用于缺陷型rAAV腺病毒的包装。
4.根据权利要求1-3任意一项所述的一种双向迷你启动子的使用方法，其特征在于，包括：
(1)将Cas9、GFP或TETR蛋白表达框通过酶切连接到双向迷你启动子正向下方，SgRNA或shRNA蛋白表达框酶切连接到双向迷你启动子反向下方；
(2)将构建完成的质粒转染T293细胞，通过WB或Q-PCR鉴定双向迷你启动子的启动效率；
(3)通过复制缺陷型rAAV腺病毒包装将质粒进入蛋白质外壳，单一病毒感染目的细胞即可达到两种元件的表达。
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