[发明专利]一种无血清细胞培养基的应用

说明书

本发明公开了一种细胞培养用血清替代物，包括如下原料：牛血清白蛋白、胰岛素、转铁蛋白、亚硒酸钠、肝素钠、β‑巯基乙醇、叶酸、乙醇胺、钼酸铵以及微量/少量胎牛血清。本发明的血清替代物，添加到常用的基础培养基里就能使细胞贴壁且增殖，可使成本大幅度降低，降低生产成本。

技术领域

本发明涉及一种培养基用血清替代物，具体涉及一种细胞培养用血清替代物。

背景技术

永生化的细胞系培养经历了几十年的发展，尽管现在大多数细胞系仍然需要用含有血清的培养基培养，但在很多情况下，具有明确组成成分的血清替代物对于后续的科学研究有很多优势：①选择性地促进特殊类型细胞的生长；②调节细胞增殖或是分化的可能性；③降低不同批次的牛血清间的质量差异，从而提高实验的重复性和准确性；④血清替代物较全血清具有明确的成分，避免了组分对实验研究的影响，降低了血清中未知成分的干扰和血源性污染。

但血清替代物的缺点：①不同类型的细胞甚至同一类型的不同细胞(肿瘤细胞)都需要不同的培养基，血清替代物的特异性给实验室保存不同类型的细胞系带来了困难；②血清替代物对试剂、水等的要求会更高。

然而，含有全血清与不含血清都会对细胞的培养产生影响。

发明内容

为了解决现有技术中存在的问题，本发明的目的是提供一种细胞培养用血清替代物，与基础培养基合用可以使细胞贴壁且增殖。

为了实现本发明目的，本发明首先通过以下技术方案实现：

一种细胞培养用血清替代物，包括如下质量浓度的原料：10％-50％牛血清白蛋白、1-10mg/L胰岛素、10-100mg/L转铁蛋白、5-10μg/mL亚硒酸钠、10-200ng/mL肝素钠、20-100μMβ-巯基乙醇、1％-10％叶酸、0-100mM乙醇胺、0-100mg/L钼酸铵、0-1％胎牛血清。

一种细胞培养用血清替代物，包括如下质量浓度的原料：10％-50％牛血清白蛋白、1-8mg/mL胰岛素、10-70mg/L转铁蛋白、5-8ug/mL亚硒酸钠、10-100ng/mL肝素钠、20-80μMβ-巯基乙醇、1％-8％叶酸、0-50mM乙醇胺、0-100mg/L钼酸铵、0％-0.5％胎牛血清。

一种细胞培养用血清替代物，包括如下质量浓度的原料：10％-25％牛血清白蛋白、1-6mg/L胰岛素、10-50mg/L转铁蛋白、5-8ug/mL亚硒酸钠、50-100ng/mL肝素钠、20-60μMβ-巯基乙醇、1％-5％叶酸、0-50mM乙醇胺、100mg/L钼酸铵、0％-0.5％胎牛血清。

本发明的有益效果在于：

本发明一种血清替代物的应用，与基础培养基合用就能使细胞贴壁和增殖，完全代替全血清的使用；可使成本大幅度降低，降低生产成本。

附图说明

此处所说明的附图用来提供对本发明实施例的进一步理解，构成本申请的一部分，并不构成对本发明实施例的限定。在附图中：

图1为实施例1中实验组与对照组的培养基培养hela、hepG2、MDA-MB-231、293T细胞形态图；

图2为实施例4中实验组的培养基培养hela、hepG2、MDA-MB-231、293T细胞形态图；

图3为分别采用添加本发明的培养基、添加10％血清的培养基以及基础培养基培养hela、hepG2、MDA-MB-231、293T细胞的细胞增殖能力的结果。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

实施例1