[发明专利]一种用于检测特纳综合征的引物及探针组合物、非诊断检测方法及试剂盒

权利要求书

1.一种用于检测特纳综合征的引物及探针组合物，其特征在于，所述引物及探针组合物包括两组靶基因特异性引物对及两组探针、一组内参基因特异性引物对及探针；

所述两组靶基因包括AR基因和SRY基因；所述内参基因为CFTR基因；

所述AR基因特异性引物对及探针包括AR基因特异性上游引物核苷酸序列SEQ IDNO.1、AR基因特异性下游引物核苷酸序列SEQ ID NO.2和AR基因探针核苷酸序列SEQ IDNO.3；

所述SRY基因特异性引物对及探针包括SRY基因特异性上游引物核苷酸序列SEQ IDNO.4、SRY基因特异性下游引物核苷酸序列SEQ ID NO.5和SRY基因探针核苷酸序列SEQ IDNO.6；

所述CFTR基因特异性引物对及探针包括CFTR基因特异性上游引物核苷酸序列SEQ IDNO.7、CFTR基因特异性下游引物核苷酸序列SEQ ID NO.8和CFTR基因探针核苷酸序列SEQID NO.9；

所述AR基因、SRY基因和CFTR基因的探针所示核苷酸序列的5′端分别标记有荧光基团，所示核苷酸序列的3′端分别标记有淬灭基团。

2.根据权利要求1所述的一种用于检测特纳综合征的引物及探针组合物，其特征在于，所述荧光基团包括FAM、NED和Cy5中的任意一种；

所述淬灭基团包括QSY。

3.一种用于检测特纳综合征的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括如权利要求1所述的引物及探针的组合物、PCR反应液、混合液和对照品。

4.根据权利要求3所述的一种用于检测特纳综合征的试剂盒，其特征在于，所述PCR反应液包括基因特异性引物对反应液和基因探针反应液；

所述基因特异性引物对反应液浓度为100-800nmol/L，优选为400nmol/L；

所述基因探针反应液浓度为50-300nmol/L，优选为200nmol/L。

5.根据权利要求3所述的一种用于检测特纳综合征的试剂盒，其特征在于，所述混合液包括热启动Taq酶、UNG酶、4种dNTP、PCR反应缓冲液、ROX荧光参比染料。

6.根据权利要求3所述的一种用于检测特纳综合征的试剂盒，其特征在于，所述对照品包括阳性对照品、正常对照品和空白对照品。

7.根据权利要求6所述的一种用于检测特纳综合征的试剂盒，其特征在于，所述阳性对照品包括特异性质粒为内参照CFTR基因、AR基因的人工合成DNA序列的质粒混合液和SRY基因的人工合成DNA序列的质粒混合液，

所述特异性质粒为内参照CFTR基因、AR基因的人工合成DNA序列的质粒混合液和SRY基因的人工合成DNA序列的质粒混合液的拷贝数比为1：1：1。

8.根据权利要求6所述的一种用于检测特纳综合征的试剂盒，其特征在于，所述正常对照品包括特异性质粒为内参照CFTR基因的人工合成DNA序列和AR基因的人工合成DNA序列的质粒混合液，

所述特异性质粒为内参照CFTR基因的人工合成DNA序列和AR基因的人工合成DNA序列的质粒混合液的拷贝数比为1：1。

9.根据权利要求6所述的一种用于检测特纳综合征的试剂盒，其特征在于，所述空白对照品为经过除菌处理过的去离子水。

10.一种用于特纳综合征的非诊断检测方法，其特征在于，采用权利要求3-9中任一所述用于检测特纳综合征的试剂盒的应用方式为检测人外周血DNA的步骤。