[发明专利]一种辅助诊断胃癌的方法及其使用的miRNA组合

说明书

本发明公开了一种胃癌早筛的方法，包括如下步骤：根据胃癌患者和健康者的外周血样本中miR‑126‑3p、miR‑150‑5p、miR‑199a‑3p、miR‑221‑3p和miR‑424‑5p的表达量，进行二元Logistic回归分析，得到LogitP值计算公式并确定阈值；检测待测者的外周血样本中上述miRNA的表达量并代入LogitP值计算公式，得到待测者的LogitP值；之后进行如下判断：如果待测者的LogitP值大于阈值，则待测者患有胃癌；如果待测者的LogitP值为阈值以下，则待测者不患有胃癌。实验证明，本发明提供的早筛胃癌的方法特异性好、灵敏度高且准确率高。本发明具有重要的应用价值。

技术领域

本发明属于生物医学领域，具体涉及一种辅助诊断胃癌的方法及其使用的miRNA组合。

背景技术

胃癌是一种发病率很高的恶性肿瘤。目前，虽然针对胃癌的诊疗市场巨大，然而市场上普遍缺乏一类新型的胃癌辅助诊断技术。为了能够精准地对早期胃癌进行筛查，防止胃癌发展成为严重危害人民身体健康、降低国民身体素质、增加医疗系统负担的不可逆的慢性病，除了发展有效的治疗方法外，癌症的诊断，尤其早期诊断，对癌症的预防和治疗具有重大的意义。目前，对早期胃癌的诊断仍依靠内镜和组织病理学检查，由于费用较高、痛苦较大和操作要求高等原因降低了患者愿意做该项检查的程度，由于普查不系统以及缺乏敏感性高、特异性强的血清学诊断标志物，大多数胃癌患者有症状时就诊已处于进展期。因此，简单可靠、无创或微创的大通量胃癌早期筛查的检查方法显得尤为重要。

目前，能够辅助诊断胃癌的无创方法有循环肿瘤细胞(CTC)检测、循环肿瘤DNA(ctDNA)检测、DNA甲基化检测以及高通量测序。但CTC和ctDNA的检测早期灵敏度低，DNA甲基化胃癌方向尚未深入研究，高通量测序则时间长、成本高，不同方法都具有一定的不足，因此限制了在临床上的应用。

miRNA是一类内源基因编码长度约为19-24nt的非编码单链RNA分子。由于miRNA能够很好的识别并配对后转录基因进而调控蛋白的表达，所以它与动物体内的生物过程息息相关。研究表明，miRNA与多种肿瘤发生有着密切的关系，它可能像癌基因或抑癌基因一样在肿瘤发生、发展过程中发挥重要的调控作用。当miRNA的行为异常时会导致疾病的发生，如miRNA-122是肝癌细胞发病的肿瘤标志物。此外，miRNA不仅存在于组织和细胞中，还稳定地存在于外周血及体液当中。所以在众多癌症的筛查、诊断及治疗过程中，miRNA是一个重要的生物指标。

发明内容

本发明的目的为对胃癌进行早筛或评估待测者的胃癌风险。

本发明首先保护一种胃癌早筛的方法，可包括如下步骤：

(1)根据若干胃癌患者的外周血样本和若干健康者的外周血样本中miR-126-3p、miR-150-5p、miR-199a-3p、miR-221-3p和miR-424-5p的表达量，进行二元Logistic回归分析，得到LogitP值计算公式并确定阈值；

(2)检测待测者的外周血样本中miR-126-3p、miR-150-5p、miR-199a-3p、miR-221-3p和miR-424-5p的表达量并代入步骤(1)得到的LogitP值计算公式，得到待测者的LogitP值；之后进行如下判断：

如果待测者的LogitP值大于阈值，则待测者患有胃癌或疑似患有胃癌；

如果待测者的LogitP值为阈值以下，则待测者不患有胃癌或疑似不患有胃癌；

所述miR-126-3p的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示；

所述miR-150-5p的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示；

所述miR-199a-3p的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示；

所述miR-221-3p的核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示；