[发明专利]抑制剂CNI-1493在猪繁殖与呼吸综合征中的应用

说明书

本申请属于动物疾病预控技术领域，具体涉及抑制剂CNI‑1493在猪繁殖与呼吸综合征中应用专利申请事宜。作为eIF5A羟脯氨酸修饰的特异性抑制剂CNI‑1493，将其处理细胞后，用于抑制PRRSV在细胞内的增殖；所述细胞为真核生物细胞。本申请中，发明以MARC‑145细胞为例，在利用eIF5A羟脯氨酸修饰特异性抑制剂CNI‑1493处理细胞后接种PRRSV，通过检测PRRSV转录及蛋白水平变化情况以及PRRSV滴度的变化，初步认定抑制剂CNI‑1493针对PRRSV具有一定的抑制作用。基于这一结果，可为PRRS的防控奠定一定的技术基础，同时也为其他抗PRRSV药物的筛选提供新的思路和借鉴。

技术领域

本申请属于动物疾病预控技术领域，具体涉及抑制剂CNI-1493在猪繁殖与呼吸综合征中应用专利申请事宜。

背景技术

猪繁殖与呼吸综合征（Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome，PRRS）又称蓝耳病，是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine Reproductive andRespiratory Syndrome Virus， PRRSV）引起的一种以母猪流产和各年龄段猪呼吸障碍为主要特征的病毒性传染病。1987年该病首先在北美发现，此后在世界范围内广泛传播，给养猪业带来巨大损失。1995年我国首次报道PRRS以来，该病在国内长期流行，危害巨大，是影响我国养猪业的重大传染病之一。PRRSV属于套式病毒目（Nidovirales），动脉炎病毒科（Arteriviridae），动脉炎病毒属（Arteriviridae），单股正链RNA病毒，基因组全长为15.4kb。病毒粒子呈球型，直径为55～60纳米。病毒有2个基因型，即PRRSV-1型和PRRSV-2型，我国流行的毒株主要为PRRSV-2型，PRRSV-1零星散发。

PRRS存在以下特征导致防控困难：一是存在持续性感染；二是亚临床感染及偶然的疫情大爆发；三是病毒高度变异；四是抗体不能产生有效的免疫保护。针对PRRSV的防控，现有技术多是从猪场环境消毒、提高生猪免疫力等综合性手段来进行。针对性的疫苗注射虽然可以提高生猪对PRRSV的抵抗力，但由于PRRSV变异较快，基因型、亚基因型多，因此使得疫苗的实际防控效果不够理想。也因此，针对性开发相关防控治疗用药仍然是十分紧迫的科研任务。

真核生物翻译起始因子（eukaryotic translation initiation factors，eIFs）是一类在真核生物蛋白翻译过程中发挥重要作用的蛋白家族，目前已发现21个成员。大量研究表明，eIFs与多种病毒存在直接或间接的相互作用。病毒可以通过调控eIFs表达及修饰，抑制核糖体对宿主mRNA招募或影响翻译起始复合体活性等方式，创造有利于自身复制的环境。由此，基于真核生物翻译起始因子功能角度，开发相关病毒复制抑制药剂，可为PRRS的防控提供一定的技术指导。

发明内容

通过对抑制剂CNI-1493在PRRSV防控中的研究，本申请目的在于提供一种防控PRRSV的新思路，同时也为相关药物开发奠定一定技术基础。

本申请所采取的技术方案详述如下。

抑制剂CNI-1493在猪繁殖与呼吸综合征中应用，作为eIF5A羟脯氨酸修饰的特异性抑制剂CNI-1493，将其处理细胞后，可以抑制PRRSV在细胞内的增殖；

所述细胞为真核生物细胞，具体例如为MARC-145细胞；

具体处理细胞时，以MARC-145细胞为例，抑制剂CNI-1493的用量为：0.1~100 μM，优选为0.1~10 μM；

所述抑制PRRSV在细胞内的增殖，通过采用Real-time PCR技术对PRRSV-N基因转录水平的表达情况进行检测判定，具体检测判定时，

针对PRRSV-N的引物序列设计如下：