[发明专利]一种小粒径琼脂糖羧基磁珠及其制备方法

权利要求书

1.一种小粒径琼脂糖羧基磁珠的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

制备有机相：

在搅拌状态下，将Span-80溶解至液体石蜡中加热制备有机相；

制备水相：

配制琼脂糖水溶液，并在搅拌加热状态下加入四氧化三铁悬浊液，制备水相；

制备小粒径琼脂糖磁珠：

在搅拌状态下，将水相滴加入有机相中，其中，所述搅拌状态下的搅拌速度为500-600rpm，所述滴加时的滴加速度为3-5滴/s，所述有机相的温度为80-85℃；

滴加完成后继续反应，之后自然降温，最后冰浴降温，制得小粒径琼脂糖磁珠；

环氧基交联反应：

将清洗后的所述的小粒径琼脂糖磁珠加入蒸馏水中，并加入氨水及氢氧化钠溶液，搅拌，然后向所述氨水及氢氧化钠溶液中加入环氧氯丙烷和DMSO的混合溶液，并开始反应，反应结束后清洗制得富集有环氧基的小粒径琼脂糖环氧磁珠；

羧基化反应：

将对氨基苯磺酸溶解至碳酸钠水溶液中，调节pH值至10～11，之后加入Magroes-4FF及所述的富集有环氧基的小粒径琼脂糖环氧磁珠并开始反应，反应结束后清洗干燥制得表面富集有羧基的小粒径琼脂糖羧基磁珠。

2.根据权利要求1所述的小粒径琼脂糖羧基磁珠的制备方法，其特征在于，所述制备有机相中搅拌状态的速度为300-400rpm，Span-80和液体石蜡的质量体积比为1.0-1.5：11.0-12.0，制得的有机相的温度为80℃。

3.根据权利要求1所述的小粒径琼脂糖羧基磁珠的制备方法，其特征在于，所述制备水相中搅拌加热状态的条件为搅拌速度为300rpm，搅拌时间为2h，搅拌温度为90℃。

4.根据权利要求1所述的小粒径琼脂糖羧基磁珠的制备方法，其特征在于，所述制备水相中琼脂糖水溶液的质量百分比为0.07-1％，所述四氧化三铁悬浊液的溶质为四氧化三铁粉末，溶剂为吐温20水溶液，其中，四氧化三铁粉末和蒸馏水的质量体积比1：20，所述吐温20在蒸馏水中的体积分数为0.5‰。

5.根据权利要求1所述的小粒径琼脂糖羧基磁珠的制备方法，其特征在于，所述制备小粒径琼脂糖磁珠中滴加完成后反应的条件为搅拌控温，其中，所述搅拌速度为800rpm，控温温度为85℃，反应时间为1h；自然降温时控制搅拌速度为250rpm，自然降温后的温度为40℃，所述冰浴降温后的温度为15℃。

6.根据权利要求1所述的小粒径琼脂糖羧基磁珠的制备方法，其特征在于，所述环氧基交联中蒸馏水的体积为100mL；所述搅拌的搅拌速度为250rpm，搅拌时间为30min。

7.根据权利要求1所述的小粒径琼脂糖羧基磁珠的制备方法，其特征在于，所述环氧基交联反应中氢氧化钠溶液的物质的量浓度为1M，小粒径琼脂糖磁珠和氨水的质量比为1:0.2，氨水和氢氧化钠溶液的体积比为1:1；环氧氯丙烷和DMSO的混合溶液中环氧氯丙烷和DMSO的体积比为2:5。

8.根据权利要求1所述的小粒径琼脂糖羧基磁珠的制备方法，其特征在于，所述环氧基交联反应及羧基化反应的反应条件为反应温度为40℃，反应时间为12-24h，反应搅拌速度为250rpm。

9.根据权利要求1所述的小粒径琼脂糖羧基磁珠的制备方法，其特征在于，所述羧基化反应中碳酸钠水溶液的物质的量浓度为0.25M，对氨基苯磺酸和碳酸钠水溶液的质量体积比为1:200，所述溶解的方式为超声溶解，所述碳酸钠水溶液和Magroes-4FF的体积比为20:1。

10.一种如权利要求1-9中任意一项所述的一种小粒径琼脂糖羧基磁珠的制备方法所制得的小粒径琼脂糖羧基磁珠，其特征在于，所述小粒径琼脂糖羧基磁珠的外表面接枝羧基。