[发明专利]一种PKEK融合蛋白及制备方法与应用有效
| 申请号: | 202110494341.9 | 申请日: | 2021-05-07 |
| 公开(公告)号: | CN113201074B | 公开(公告)日: | 2023-06-23 |
| 发明(设计)人: | 杨晓纯;曹春来;刘合栋;李素雯;李张万金;梁雄基;樊昌;梁芷瑜;周翠;何秀仪;黄国周;郭凤羽;张鹏 | 申请(专利权)人: | 珠海联邦制药股份有限公司 |
| 主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C07K5/117;C12N15/62;C12N15/70;C12N1/21;A61K38/07;A61P17/00;A61P17/16;C12R1/19 |
| 代理公司: | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人: | 苏运贞 |
| 地址: | 519040 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 pkek 融合 蛋白 制备 方法 应用 | ||
1. 一种PKEK融合蛋白,其特征在于:所述的PKEK融合蛋白的结构式如下:A–Dd-(PKEK-B)n ;其中:A为伴侣蛋白;Dd为蛋白酶酶切位点;B为柔性连接肽;n 为10~30 的整数;d为1;
所述的柔性连接肽为 AK、GK、AAK、AAGK、GGAAK或GGSASK;
所述的柔性连接肽中的K为蛋白酶酶切位点;
所述的Dd为K;
所述的伴侣蛋白为 TAF12时,所述的柔性连接肽为 AK、GK、AAK、AAGK或GGAAK;
所述的伴侣蛋白为TAF12与Pagp融合形成的伴侣蛋白时,所述的柔性连接肽为AAK;
所述的伴侣蛋白为TAF12与KSI融合形成的伴侣蛋白时,所述的柔性连接肽为AAK;
所述的伴侣蛋白为TAF12与GYGB融合形成的伴侣蛋白时,所述的柔性连接肽为AAK;
所述的伴侣蛋白为 KSI时,所述的柔性连接肽为 GGAAK或GGSASK;
所述的伴侣蛋白为 PagP时,所述的柔性连接肽为 AAK;
所述的伴侣蛋白为KSI与 PagP融合形成的伴侣蛋白时,所述的柔性连接肽为AAK;
所述的伴侣蛋白为Pap3.30、GDF15或GYGB时,所述的柔性连接肽为AAK。
2.一种编码权利要求1所述的PKEK融合蛋白的基因。
3.一种重组载体,其特征在于:含有权利要求2所述的基因;是将权利要求2所述的基因克隆入表达载体得到。
4.一种重组表达菌株,其特征在于:含有权利要求3所述的重组载体。
5. 权利要求1所述的PKEK融合蛋白在制备美白多肽 PKEK中的应用。
6.一种利用基因工程技术生产美白多肽PKEK的制备方法,其特征在于包括如下步骤:
S1、获得包含编码如权利要求1所述的PKEK融合蛋白的基因的重组载体;
S2、将步骤 S1 获得的重组载体转入基因工程菌株中,得到重组表达菌株;发酵培养重组表达菌株,收集融合蛋白的包涵体;
S3、溶解、酶切融合蛋白的包涵体,分离纯化即得活性美白多肽PKEK。
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