[发明专利]基因TSA在检测鸡枞源性成分中的应用

说明书

本发明公开一种基因TSA在检测鸡枞源性成分中的应用，建立一套定性定量PCR检测鸡枞的方法，以及对鸡枞的深加工产品进行检测验证，经过分析，发现TSA基因的BLAST比对结果图中显示，没有任何其它基因的全部序列与TSA基因的序列相同或相似，这说明TSA基因与其它基因没有同源性，具有极强的物种特异性，因此，挑选TSA基因作为鸡枞的候选内标准基因，可快速、灵敏地检测食品中的鸡枞源性成分，且本方法灵敏度高，特异性强，操作简单、成本低廉，反应结果易于观察，非常适用于现场实时检测，对鸡枞及其深加工产品进行快速生物源检测具有良好的发展前景。

技术领域

本发明涉及生物物种鉴定和PCR检测技术领域，具体涉及一种基因TSA在检测鸡枞源性成分中的应用。

背景技术

鸡枞（Collybiaalbuminosa）因味似鸡肉，又名鸡肉丝菌。主要分布在亚、非的热带、南太平洋岛屿和亚洲的亚热带区域，我国鸡枞则主产于云南、贵州、四川、台湾、西藏等地。鸡枞含有丰富的氨基酸、核黄素以及K、Fe、Cu、Mg、Zn、Ca等多种矿物质元素，蛋白质和总糖含量分别达到了32.82%、36.79%，是一种味道鲜美、营养价值极高的食用菌。但由于其与白蚁复杂的共生关系，使得鸡枞的生长环境极为苛刻，尚未有人工大量生产的报道，这也导致其价格居高不下。

目前鸡枞产品种类丰富，尤其随着深加工产品的开发，各种产品层出不穷，随之而来各种掺伪造假现象逐年增多。由于产品的深加工使得依赖传统的形态学检验无法应用，随着分子生物学技术的快速发展，分子方法快速、准确、特异性强的优点在鸡枞及其深加工产品检验具有良好的应用前景。

内标准基因作为一种表达稳定、物种特异性强的基因，在食品掺假的检测中得到了广泛应用。目前，对于内标准基因的开发与研究主要集中在农作物上，比如小麦、油菜、大豆、棉花、玉米、水稻等，其内标准基因已被广泛应用于成分来源的鉴别和分析中。而鸡枞的内标准基因尚未见到相关报道，为了建立一种能够快速、准确鉴定鸡枞的方法，有必要对鸡枞的内标准基因进行开发。

发明内容

本发明目的是提供一种基因TSA在检测鸡枞源性成分中的应用，以基因TSA作为内标基因，鉴定食品成分中是否含有鸡枞的应用，基因TSA的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

本发明还提供一种用于检测鸡枞源性成分的试剂盒，以基因TSA为靶基因建立的试剂盒，包括扩增基因TSA的特异性引物，采用PCR方法检测内标基因TSA，特异性引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示，试剂盒还包括扩增用常规试剂。

本发明确定的用于检测鸡枞源性成分的基因TSA，设计了用于检测该基因的定性PCR和定量PCR的引物并用于试剂盒，建立了检测鸡枞源性成分的相应PCR方法，该方法费时少，特异性好，灵敏度高，操作简单，不需要专业人员操作，结果易于观察，非常适于鸡枞食品的检验分析。

附图说明

图1为TSA基因在Nucleotide数据库中的BLAST分析结果；