[发明专利]抗纤维蛋白-2抗体序列、四肽链分子及免疫球蛋白分子有效
| 申请号: | 202110492817.5 | 申请日: | 2021-05-07 |
| 公开(公告)号: | CN113173989B | 公开(公告)日: | 2022-09-06 |
| 发明(设计)人: | 王建琳;尹燕博;徐守振;曲雪婷;高倩文 | 申请(专利权)人: | 青岛农业大学 |
| 主分类号: | C07K16/08 | 分类号: | C07K16/08;C12N15/13;C12N15/70;G01N33/569;A61P31/20 |
| 代理公司: | 北京汇捷知识产权代理事务所(普通合伙) 11531 | 代理人: | 盛君梅 |
| 地址: | 266109 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 纤维蛋白 抗体 序列 四肽链 分子 免疫球蛋白 | ||
本发明属于病毒蛋白抗体技术领域,公开了一种抗纤维蛋白‑2抗体序列、四肽链分子及免疫球蛋白分子,所述病毒蛋白抗体序列包括:所述重链可变区的氨基酸序列为SEQ ID NO:1,所述核苷酸序列为SEQ ID NO:3;所述轻链可变区的氨基酸序列为SEQ ID NO:2,所述核苷酸序列SEQ ID NO:4。本发明提供的鸡源化抗血清4型禽腺病毒纤维蛋白‑2抗体的重链、轻链的可变区氨基酸序列和核苷酸序列,为构建高亲和力、低免疫原性的鸡源化抗血清4型禽腺病毒纤维蛋白‑2的基因工程抗体提供支持,对推动血清4型禽腺病毒感染的诊断和鸡源化抗体药物的发展具有重要意义。
技术领域
本发明属于病毒抗体技术领域,尤其涉及一种抗血清4型禽腺病毒纤维蛋白-2抗体序列、四肽链分子、免疫球蛋白分子及应用。
背景技术
血清4型禽腺病毒属于禽腺病毒科禽腺病毒属无囊膜的双链线性DNA病毒,外形呈立体对称的二十面体、无囊膜,直径为70-90nm。根据抗原性不同,禽腺病毒可分为禽腺病毒-I群(Fowl adenovirus,FAdVs)、II群和III群。根据分子特征和限制性内切酶分析,FAdVs可分为A-E 5个种,根据血清交叉中和试验结果可分为12个血清型(即1-8a和8b-11)。FAdVs感染鸡主要引起肌胃糜烂、包涵体肝炎和心包积液-肝炎综合征等,同时还造成生长缓慢和长时间免疫抑制导致继发感染增加。近年来,国内外FAdVs感染呈现明显增加的趋势,给肉鸡养殖业造成了严重的经济损失。
FAdVs感染鸡可出现多种病理变化,如鸡包涵体肝炎、肝炎-心包积液综合征、肌胃糜烂等,其中鸡包涵体肝炎主要由血清2、7、8a、8b和II型FAdVs感染引起,发病率高达60-70%,被感染鸡出现突然死亡,死亡率为10-30%;鸡肝炎-心包积液综合征由血清4型FAdVs感染引起,主要感染3-6周龄肉鸡,死亡率为30-70%;肌胃糜烂主要由血清I型FAdVs感染引起,死亡率为3-8%。血清4型FAdVs感染已成为严重影响我国养禽业的重要疾病,给我国养鸡业造成了巨大的经济损失。
针对FAdVs感染的诊断和疫苗研究已有报道。目前,检测FAdVs的经典方法主要有病毒的分离鉴定、病毒中和实验等;在实际生产中,以分子生物为基础的PCR检测方法是进行病原测定的主要方法,如针对六邻体蛋白基因和纤维蛋白基因进行的PCR方法、针对六邻体蛋白基因进行的PCR-RFLP分型方法等是目前主要的诊断方法。研究报道有FAdVs灭活疫苗、针对六邻体蛋白和纤维蛋白-2构建的亚单位疫苗等。但有关FAdVs的血清学诊断方法和生物学治疗方法较少,仅见个别卵黄抗体的研究报道。
鉴于血清4型FAdVs感染造成的严重经济损失,且目前仍无较好的血清学诊断方法和有效治疗药物。因此,为了更好地诊断和治疗该病,研制出抗体效价高、特异性好的抗体用于实验室研究和临床疾病的血清学诊断;研制出免疫保护率高、安全性好、成本低廉、适用于商业化生产的抗血清4型FAdVs的抗体用于临床该病的治疗,具有重要的意义。
通过上述分析,现有技术存在的问题及缺陷为:有关FAdVs的血清学诊断方法和生物学治疗方法较少,仅见个别卵黄抗体的研究报道,且目前仍无较好的血清学诊断方法和有效治疗药物。
解决以上问题及缺陷的难度为:要想得到一定规模的抗体库,首先要做的是借助PCR技术,获取机体本源的全套抗体基因,目前关于鸡源抗体基因序列报道较少,需要我们对抗体轻、重链可变区序列进行多对引物验证。
解决以上问题及缺陷的意义为:有利于筛选到针对特异性抗原的抗体,对后续诊断及治疗效果会更有优势。
发明内容
针对现有技术存在的问题,本发明提供了一种抗血清4型禽腺病毒纤维蛋白-2抗体序列、四肽链分子、免疫球蛋白分子及应用。
本发明是这样实现的,一种抗血清4型禽腺病毒纤维蛋白-2抗体序列,所述抗体序列包括:
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