[发明专利]一种生产高酶活力灵芝漆酶的菌种和生产方法

权利要求书

1.一种生产高酶活力灵芝漆酶的菌种，其特征在于，所述菌种为四川灵芝(ganodermasichuanense)藏灵芝二号；所述藏灵芝二号的保藏编号为CGMCC NO.21936。

2.一种生产高酶活力灵芝漆酶的方法，其特征在于，包括以下步骤：

将权利要求1所述菌种进行扩繁培养，得到发酵菌种；所述扩繁培养包括菌种活化、摇床培养、一级放大和二级放大；

将发酵菌种接种到发酵培养基上进行发酵培养，得到酶活力为20.581～21.23U/ml的灵芝漆酶的粗酶液；

所述菌种活化的培养基包括以下重量份的组分：蛋白胨2～2.5份、葡萄糖20～25份、磷酸二氢钾0.4～0.5份、磷酸氢二钾1.0～1.2份、七水硫酸镁0.5～0.6份、维生素B10.01～0.02份、琼脂18～20份和水1000份；所述摇床培养的培养基为不含琼脂的菌种活化培养基；

所述一级放大的培养基、二级放大的培养基和发酵培养基均包括以下重量百分含量的组分：玉米淀粉2％～3％、葡萄糖1.5％～3％、磷酸二氢钾0.1％～0.2％、硫酸镁0.05％～0.1％、酵母粉0.2％～0.4％、豆油0.05％～0.1％和余量的水。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述扩繁培养和发酵培养的温度均为26～28℃。

4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述菌种活化的时间为20～30d。

5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述摇床培养的时间为5～7d；所述摇床培养的振荡速度为100～200rpm。

6.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述发酵培养的条件包括：通气量为1～2V/V·min，搅拌速度为100～120rpm。

7.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，得所述粗酶液后，还包括提取和纯化处理；所述提取和纯化处理包括：压滤、硫酸铵沉淀、透析和层析；所述压滤的压力为50～60kg。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述硫酸铵沉淀的方法包括：将压滤后得到的液体与40wt.％的硫酸铵混合，得到第一粗灵芝漆酶和上清液；

将上清液与80wt.％硫酸铵混合，得到第二粗灵芝漆酶和上清液；

将第一粗灵芝漆酶和第二粗灵芝漆酶混合，得到粗灵芝漆酶。

9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述层析的装置包括葡聚糖G-100凝胶柱；所述层析的流速为0.5ml/min。