[发明专利]用于防治堆型艾美耳球虫的重组多肽及疫苗

说明书

本发明涉及兽用生物制品领域，具体而言，涉及一种用于防治堆型艾美耳球虫的重组多肽及疫苗。通过免疫堆型艾美耳球虫重组多肽疫苗EA‑FLTI蛋白，能有效控制鸡体感染堆型艾美耳球虫，大大降低养鸡场抗球虫药的使用量，有效控制鸡球虫病。

技术领域

本发明涉及兽用生物制品领域，具体而言，涉及一种用于防治堆型艾美耳球虫的重组多肽及疫苗。

背景技术

堆型艾美耳球虫(Eimeria acervulina,E.acervulina)是一种专性细胞内寄生的顶复门原虫，可引起严重危害集约化养鸡业生产的鸡球虫病。在无预防措施或预防失败(如因抗药性问题致药物无效)的情况下，鸡发病率可达30％～100％，致死率可高达80％。全球每年因鸡球虫病引起的经济损失超过30亿美元以上。目前对鸡球虫病的防控仍主要是执行“在饲料中添加各种抗球虫药进行药物防控”和“活卵囊疫苗进行疫苗防控”的技术方法。但鸡球虫广泛而严重的抗药性，以及活卵囊疫苗存在的潜在散毒风险使鸡球虫病的防控面临严峻挑战，新的抗球虫药物及疫苗研制成为亟待解决的问题。然而，人们至今对球虫与宿主细胞的详细互作机制尚无系统认识，造成新型抗球虫药物及分子疫苗的研制面临巨大困难。

微线蛋白是一种在顶复门原虫中高度保守的微线分泌蛋白，可以和棒状体分泌的颈部蛋白共同形成“运动结合体(Moving Junction)”，共同完成虫体与宿主细胞的粘附作用，是协助虫体进入宿主细胞的关键物质。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一方面涉及重组多肽，其氨基酸序列为SEQ ID NO:3所示。

本发明的第二方面涉及分离的核酸，其编码如上所述的重组多肽。

本发明的第三方面涉及载体，其具有如上所述的核酸。

本发明的第四方面涉及宿主细胞，其基因组中掺有如上所述的核酸，或如上所述的载体。

本发明的第五方面涉及如上所述的重组多肽的制备方法，包括：

在适宜的条件下培养如上所述的宿主细胞，收集培养液和/或所述宿主细胞的裂解液，分离纯化得到所述重组多肽。

本发明的第六方面涉及疫苗，其含有如上所述的重组多肽、如上所述的核酸或如上所述的载体。

本发明的第七方面涉及成套试剂盒，其包含如上所述的疫苗，以及用于接种所述疫苗的容器。

本发明的第八方面涉及如上所述的重组多肽、如上所述的核酸或如上所述的载体在制备用于防治堆型艾美耳球虫的药物中的应用。

本发明的有益效果为：

通过免疫堆型艾美耳球虫重组多肽疫苗EA-FLTI蛋白，能有效控制鸡体感染堆型艾美耳球虫，大大降低养鸡场抗球虫药的使用量，有效控制鸡球虫病。

附图说明

为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本发明一个实施例中堆型艾美耳球虫重组多肽疫苗EA-FLTI真核表达质粒在DF-1细胞中表达的WB分析(M.蛋白质分子质量标准；1.pCDA3.1-EA-FLTI1转染至DF-1细胞中的表达产物；2.DF-1细胞总蛋白；3.原核表达阳性对照)；

图2为本发明一个实施例中堆型艾美耳球虫重组多肽疫苗EA-FLTI表达产物SDS-PAGE电泳分析图(M.蛋白质分子质量标准；1.未诱导菌液；2.37℃诱导后菌液；3-4.纯化后重组表达蛋白)；